[发明专利]一种舒更葡糖的分离纯化方法

说明书

本发明提供了一种高效分离纯化舒更葡糖的方法，包括以下步骤，将舒更葡糖粗提取物进行溶解、过滤；将上述过滤后的溶液上样到装有弱阴离子交换树脂中进行层析；采用盐溶液作为流动相对目标产物进行洗脱；分段收集目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总。本发明用于舒更葡糖的深度精纯，仅需一步层析纯化即可满足舒更葡糖纯度大于99.0％，单杂小于0.1％的要求，纯化收率高而稳定，本发明采用醋酸钠水溶液和氯化钠水溶液作为流动相，不采用有机溶剂，所用流动相安全、无污染且成本较低。同时本发明分离方法简单方便，可用于规模化生产，大大降低生产成本。

技术领域

本发明涉及药物纯化领域，特别是一种高效分离纯化舒更葡糖的方法。

背景技术

舒更葡糖(Sugammadex)属于甾体类肌松药的选择性拮抗剂，用于快速逆转成年患者手术中麻醉剂罗库溴铵、维库溴铵引起的神经肌肉阻断。舒更葡糖是人工合成改良γ-环糊精，由亲脂核心和亲水外端组成。舒更葡糖经由静脉注射给药，可以显著改善手术后肌松的恢复，短时间内迅速逆转甾体类肌松药的神经肌肉阻滞作用对于提高全身麻醉的安全性具有积极的意义。

结构式如下：

目前国内外专利、文献等对舒更葡糖的报道多为合成方法和临床方面的专利，分离纯化方法鲜有报道。CN201810153493.0提供了一种舒更葡糖的分离纯化方法，其中描述了采用C18反相柱色谱分离纯化，流动相为超纯水和乙腈，该方法使用溶剂为有机试剂，有一定危害。因此有必要对舒更葡糖的分离、纯化和制备做更进一步的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效分离纯化舒更葡糖的方法，仅需一步层析纯化即可满足舒更葡糖纯度大于99.0％，单杂小于0.1％的要求，纯化收率高而稳定，同时本发明使用纯水相，无有机溶剂，成本低，环保绿色，适合工业化分离纯化。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：一种舒更葡糖的分离纯化方法，包括以下步骤：将舒更葡糖粗提取物进行溶解、过滤；将上述过滤后的舒更葡糖溶液上样到弱阴离子交换树脂层析柱中进行层析；采用盐溶液作为流动相对所述舒更葡糖溶液进行洗脱；分段收集目的峰值的舒更葡糖溶液，对符合要求的组份液进行汇总，得到纯化的舒更葡糖。

优选的，所述流动相为：A相：pH＝5.5的20mM醋酸钠；B相：pH＝5.5的20mM醋酸钠+1MNaCl。

优选的，所述弱阴离子交换树脂的微球型号是UniDEAE。

优选的，上样前，对所述弱阴离子交换树脂层析柱进行平衡，先用40％-50％B相进行除杂，后用100％A相进行平衡。

优选的，所述梯度洗脱过程为，先用A相冲洗，再用A、B相对主峰进行梯度洗脱。

优选的，所述B相溶液中，洗脱梯度浓度范围为0％-32％。

优选的，所述梯度洗脱过程为，第一阶段，用A相冲洗；第二阶段，用A、B相梯度洗脱主峰，其中，B相的浓度由0％提高至4％；第三阶段，B相的浓度由4％提高至8％；第四阶段，B相的浓度由8％提高至20％；第五阶段，B相的浓度由20％提高至32％。

优选的，所述舒更葡糖粗提取物的纯度为90％-95％。

优选的，所述纯化的舒更葡糖的纯度在99.0％以上。

优选的，所述纯化的舒更葡糖的收率在59.0％以上。

UniDEAE是一种弱阴离子交换层析介质，其基质为单分散的聚丙烯酸酯，基质表面还键合了叔胺基功能基团。该聚丙烯酸酯基质疏水性很弱，可以在纯水相中分离纯化舒更葡糖，同时它具有高分子聚合物基质的特点，具有很好的耐碱性，可以在比较高的碱性条件下冲洗活化层析介质，具有更优异的耐冲击性、耐碱性及耐老化性，远远优于传统硅胶基质的反相色谱填料，因此具有很长的使用寿命。