[发明专利]一种复合脉冲细胞电融仪和控制方法

说明书

本发明提出了一种复合脉冲细胞电融仪和控制方法，该电融仪包括负载电阻，所述负载电阻的一端接地，所述负载电阻的另一端连接正弦电路的一端、微秒脉冲电路的一端和纳秒脉冲电路的一端；所述正弦电路包括高频高压正弦模块，所述微秒脉冲电路包括微秒脉冲模块，所述纳秒脉冲电路包括纳秒脉冲模块。本发明能很好的融合不同尺寸的细胞，有效地提高了细胞融合的成功率。

技术领域

本发明涉及细胞融合仪器技术领域，具体涉及一种复合脉冲细胞电融仪和控制方法。

背景技术

细胞融合也可称为细胞杂交，是指两个或两个以上的细胞通过介导和培养，在离体条件下用人工方法通过无性方式融合形成一个具有双核或者多核细胞的过程。自然界的有性繁殖保证了遗传物资的稳定性，在物种间设置了各种的屏障，而人工诱导细胞融合技术，能够把来自于不同种类生物的单个细胞融合成一个杂核细胞，这个新细胞包含多个亲本细胞的遗传物质，具有新的遗传或生物特性，能够培养成新的物种、品系或成为新的细胞工程产品。

细胞融合作为一项迅速发展的新兴细胞工程方法，已在农业、医药等领域取得了开创性的研究成果，而且应用领域不断扩大，成为研究体细胞重编程以及定位基因的常规手段。常见的细胞融合方法主要有以下四种:病毒融合法、细胞化学融合法、细胞电融合法和细胞激光融合法。

与其它细胞融合技术相比，细胞电融合技术具有可控性强、重复性强、异源细胞融合效率高、对细胞无毒性、应用对象广泛以及样本损耗低等优点，逐渐成为了实现细胞融合最重要的手段。传统的细胞电融合采取的是微秒脉冲电融合，但是微秒脉冲具有一定的缺陷，对于融合不同尺寸的细胞时，大细胞会比小细胞先产生穿孔，因此作用相同强度的电场的情况下，当小细胞发生穿孔的时候，大细胞可能早已处于过度穿孔的死亡状态，在实验过程中存在成功率低、成本昂贵、效率低下，重复性差等问题。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题，特别创新地提出了一种复合脉冲细胞电融仪，以提高融合率和融合效率。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了一种复合脉冲细胞电融仪，包括负载电阻，所述负载电阻的一端接地，所述负载电阻的另一端连接正弦电路的一端、微秒脉冲电路的一端和纳秒脉冲电路的一端；

所述正弦电路包括第三开关继电器，第三开关继电器的一端与负载电阻的另一端连接，第三开关继电器的另一端连接高频高压正弦模块的一端，高频高压正弦模块的另一端接地；

所述微秒脉冲电路包括第二开关继电器，第二开关继电器的一端与负载电阻的另一端连接，第二开关继电器的另一端连接微秒脉冲模块的一端，微秒脉冲模块的另一端接地；

所述纳秒脉冲电路包括第一开关继电器，第一开关继电器的一端与负载电阻的另一端连接，第一开关继电器的另一端连接纳秒脉冲模块的一端，纳秒脉冲模块的另一端接地。

正弦电压输出模块用于对盛放有融合液和细胞的培养皿施加正弦电压，通过正弦电压使细胞排列并紧密接触，形成细胞链。纳秒脉冲输出模块用于对培养皿施加方形脉冲，能够将细胞的外膜穿破形成小孔。微秒脉冲输出模块用于对培养皿上已有孔的基础上进一步穿破，同时也能将已复原的孔再次冲破，形成便于融合的孔。

上述方案中：所述微秒脉冲模块或/和纳秒脉冲模块包括若干电容电路，该电容电路包括支路二极管，所述支路二极管的负极连接电容的一端和开关组件的第一端，所述开关组件的第二端连接电容的另一端。