[发明专利]人NF186抗原、人NF186抗体检测试剂盒及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了人NF186抗原、ELISA检测试剂盒及其制备方法与应用。人NF186抗原包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，还提供了两种分别含有上述两种人NF186的抗原的检测试剂盒，以及同时含有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的抗原的检测试剂盒。该人NF186检测试剂盒，检测人血清中的NF186抗体，特异性强，反应灵敏度高，高通量、成本低，能够对慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)进行诊断，适于大规模推广应用。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及人NF186抗原、人NF186抗体检测试剂盒及其制备方法与应用。

背景技术

慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(chronic inflammatory demyelinatingpolyradiculoneuropathy,CIDP)是一类由免疫介导的慢性运动感觉性周围神经病。该病在世界范围内较为常见，发病率为(1～9)/10万。根据临床表现，CIDP可分为经典型和变异型。经典型CIDP表现为对称的肢体无力和感觉障碍，腱反射减弱或消失，病程为慢性进展或缓解复发并持续≥8周。2010年欧盟神经学会/周围神经学会诊断标准将变异型CIDP分为远端获得性脱髓鞘性对称性神经病(distal acquired demyelinating symmetric)、非对称型(Lewis－Sumner syndrome)、纯运动型、纯感觉型和局灶型。在CIDP的发病机制中，细胞及体液免疫均发挥了作用。但长期以来，相关抗体的研究并未取得突破性进展。CIDP特异性抗体的研究首先集中在髓鞘蛋白，但目前并未发现髓鞘蛋白0、髓鞘蛋白2或髓鞘蛋白22(myelinprotein22)参与了CIDP的发病机制。近年来，有关CIDP生物标志物的研究转向朗飞结相关区域，一些重要的细胞黏附分子成为研究的热点。朗飞结是有髓纤维的重要结构，包括结区、结旁区、近结旁区及结间区共4个区域。每个区域由不同的离子通道、蛋白和细胞黏附分子等有序排列，共同维持神经的正常结构及功能。结区分布有密集的Na+通道和K+通道，主要参与神经冲动的传导；神经束蛋白(neurofascin，NF)186、神经细胞黏附分子(neuronal cell adhesion molecule，NrCAM)和神经胶质蛋白(gliomedin)则参与维持朗飞结的稳定和Na+通道的聚集。结旁区的重要结构是由位于轴膜端的接触蛋白1(contactin-1，CNTN1)、接触蛋白相关蛋白1(contactin-associated protein1，CASPR1)以及位于髓鞘端的NF155组成的复合体，该复合体的功能是阻隔结区的Na+通道和近结旁区的K+通道，并使髓鞘锚定在轴膜上。结构蛋白、细胞黏附分子抗体的发现有助于揭示CIDP的发病机制，寻找特异性的生物标志物并制定个体化的治疗方案。从微观结构角度提出的朗飞结/结旁疾病(nodo－paranodopathy)概念，为深入了解CIDP提供了更加广阔的视角。研究表明，30％的CIDP患者血清中的IgG抗体会与结区、结旁区结构结合，参与CIDP的病理生理机制。此外，结区/结旁区抗体阳性的患者具有特征性的临床表现和特殊的治疗选择。NF155神经束蛋白(Neurofascin)是郎飞氏结的一种蛋白组分，CIDP患者中检出的抗神经束蛋白抗体主要针对的靶点是NF155。NF155主要位于结旁区的髓鞘端，与位于轴膜端的CNTN1和CASPR1组成复合体，隔离结区与近结旁区的离子通道，维持结旁区的正常结构和神经冲动的正常传递。目前还没有人NF186抗体检测试剂盒的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了一种人NF186抗原及其制备方法、人NF186抗体检测试剂盒与应用，该试剂盒具有较高灵敏度和特异性，对慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)的检测有重要价值。

本发明是这样实现的：

本发明的目的之一在于一种人NF186抗原，包括以下任意一种片段或者两种片段：

片段1：NF186-333，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；