[发明专利]小花清风藤中七种黄酮类化学成分的提取分离方法

权利要求书

1.小花清风藤中七种黄酮类化学成分的提取分离方法，其特征在于：是采用多种色谱方法对小花清风藤的甲醇提取物进行脱色、分离纯化；应用TLC、HPLC跟踪监测，分离得到；

提取分离方法具体包括以下步骤：

（1）将干燥的小花清风藤茎和叶粉碎成粗粉10.8kg；

（2）粗粉用甲醇回流提取3次，每次提取2h，每次加入60L甲醇，65℃保持微沸，合并滤液，减压浓缩致无醇味；

（3）将步骤（2）中浓缩后的滤液，加0.8L水溶解，上样于D-101大孔树脂，依次用25%、70%、100%甲醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得浸膏，浸膏中包括25%甲醇洗脱部位0.75 kg、70%甲醇洗脱部位1.67 kg和100%甲醇洗脱部位1.17 kg；

（4）取70%甲醇洗脱部位浸膏经硅胶色谱柱分离，以二氯甲烷和甲醇的体积比为10:1作为流动相，进行洗脱，得2个组份，组份1-1和组份1-2；

（5）组份1-1过硅胶色谱柱，以二氯甲烷和甲醇的体积比为20:1~4作为流动相，梯度洗脱，再经过制备液相色谱，以流动相为甲醇和水的体积比为60:40，洗脱，得化合物Ⅴ 46mg、Ⅵ 62 mg和Ⅶ 41 mg，所述化合物Ⅴ为山奈酚-3-O-芸香糖苷，所述化合物Ⅵ为异鼠李素-3-O-芸香糖苷，所述化合物Ⅶ为山奈酚；

（6）组份1-2经ODS-A-HG反相色谱柱，以甲醇和水的体积比为3:7为流动相，洗脱，得组分1-2-1和1-2-2；

（7）组份1-2-1经制备液相色谱，以流动相为甲醇和水的体积比为60:40，洗脱，得化合物Ⅲ137 mg和Ⅳ 89 mg，所述化合物Ⅲ为芦丁，所述化合物Ⅳ为Tsubakioside A；

（8）组份1-2-2经制备液相色谱，以流动相为甲醇和水的体积比为50:50，洗脱，得化合物Ⅰ 59 mg和Ⅱ 153 mg，所述化合物Ⅰ为槲皮素-3-O-龙胆双糖苷，所述化合物Ⅱ为Camellianoside。

2.如权利要求1所述的小花清风藤中七种黄酮类化学成分的提取分离方法，其特征在于：所述的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ为黄酮类化合物。