[发明专利]一种锆基金属有机框架比色阵列传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种锆基金属有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒相互作用的比色阵列传感器的应用，其特征在于包括如下步骤：

(1)用PH＝7-7.8的Tris-HCl稀释锆基金属有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒至最终合适浓度；其中所述的锆基金属有机框架包括分子式符合UiO-66(Zr)-X物质中的一种，其中X可以为-NH₂、-NO₂、-(OH)₂、-Br、-COOH其中的一种；所述的锆基金属有机框架的大小为70-500nm；所述的金纳米颗粒的尺寸为10-200nm；

(2)在96孔微孔板中，将一定量的不同的单链DNA修饰金纳米颗粒分别移加到每个孔中，并通过Safire酶标仪在520nm记录溶液的初始吸收强度为A₀；

(3)添加一定浓度的不同分析物，即多种蛋白或不同的精液样本，在25-40℃的环境中孵育30-120分钟；

(4)上述混合物溶液中添加一定量的锆基金属有机框架，25-40℃的环境中反应2-12个小时以结合并沉淀剩余的单链DNA修饰金纳米颗粒或蛋白；

(5)将没有沉淀的上清液小心地移加到新的96孔微量培养板中并测量反应后吸收强度，记录为A，相对吸收强度变化，即A₀-A，用作吸光度响应变化值；

(6)记录吸光度响应变化值，用相应的数据软件对原始数据矩阵进行线性判别分析，从而实现对多种蛋白或不同精液样本的检测分析。

2.根据权利要求1所述的应用，包括锆基金属有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的制备方法，其特征在于：

(1)锆基金属有机框架的制备：利用锆的金属前驱体、有机配体溶解在10mL DMF中并转移到Teflon衬里中，超声处理后，高温静置反应；所述的锆的金属前驱体锆的前驱体包括四氯化锆、二氯氧化锆、正丁醇锆、正丙醇锆中的至少一种，浓度为5-20mg/mL；所述的反应温度为100-200℃；所述的反应时间为10-24小时；

(2)金纳米颗粒的制备：50mL氯金酸和5mL柠檬酸三钠混合加热反应合成金纳米颗粒；所述的氯金酸浓度为1-5mM；所述的柠檬酸三钠浓度为20-50mM；所述的反应时间为10-60分钟；

(3)单链DNA修饰金纳米颗粒：将硫醇化的DNA链与三(2-羧乙基)膦反应激活后，与所制备的AuNPs胶体溶液一起温育；之后，将0.1M NaCl逐步加入混合物中以“老化”，并继续温育；所述的单链DNA包括巯基修饰的Poly A、Poly T、Poly C、及A、T、C、G随机的组合；所述的单链DNA的长度为5-50bp；所述的三(2-羧乙基)膦浓度为1-50mM；所述的温育时间为5-24小时，温育温度为25-40℃。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的锆基金属有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒相互作用的比色阵列传感器可以同时对多种蛋白质进行低浓度的分析检测。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的锆基金属有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒相互作用的比色阵列传感器可以同时对不同类型男性不育的精液进行分析检测。