[发明专利]微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法

权利要求书

1.一种微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法，其特征在于，包括：

步骤一：对玻璃片表面用BS³溶液进行处理。

2.根据权利要求1所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述方法还包括步骤二：在该表面键合有BS³的玻璃载体上进行ELISA实验。

3.根据权利要求1所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述步骤一包括：

步骤1)使用丙酮、异丙醇和去离子水依次超声清洗玻璃片4～6min；

步骤2)用氮气吹干玻璃片后，对玻璃片表面进行plasma处理，实现其表面羟基化，再在玻璃片表面加入浓度为8％～12％的APTMS溶液，在室温下反应13～17min；

步骤3)将玻璃片清洗风干后，使用热板对该玻璃片在75～85℃范围内加热1.8～2.2h，实现表面键合；

步骤4)恢复室温后在玻璃片表面加入4～6mM的BS³溶液，在室温下与表面已键合有APTMS的玻璃片表面反应23～27min，清洗后得到表面键合有BS³的玻璃载体。

4.根据权利要求1-3所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，在所述步骤2)中，对玻璃片表面进行plasma处理，打60W plasma85～95s，实现其表面羟基化。

5.根据权利要求2所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述步骤二包括：

步骤(1)在该玻璃载体表面加入18～22μg/ml的cTnI单克隆抗体溶液室温下反应1.8～2.2h，实现cTnI捕获；

步骤(2)清洗该玻璃载体后，再加入4～6％的BSA溶液室温下反应0.8～1.2h；

步骤(3)清洗该玻璃载体后，再加入不同浓度cTnI溶液室温下反应1.8～2.2h；

步骤(4)清洗该玻璃载体后，加入18～22μg/ml cTnI多克隆抗体溶液室温下反应1.8～2.2h；

步骤(5)清洗该玻璃载体后，加入1.8～2.2μg/ml荧光标记的兔抗山羊IgG溶液室温下反应0.8～1.2h；

步骤(6)清洗该玻璃载体后，在荧光显微镜下测得各浓度cTnI对应的荧光强度，得到荧光免疫曲线，并与未经过化学处理的干净玻璃片进行对比。

6.根据权利要求1-5所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，所述cTnI溶液的浓度取值范围为1pg/ml-1μg/ml。

7.根据权利要求3或5所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述室温的温度范围为22℃～26℃。