[发明专利]一种鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法

权利要求书

1.一种鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，以1-(2-喹恶啉)-1,2,3,4-丁四醇为靶标物质，检测出蜂蜜样品中所述靶标物质含量≥100.0mg/kg时，即可判定该蜂蜜经过了热加工，为非天然封盖成熟的蜂蜜；

用于检测的制样条件为：取蜂蜜样品溶解于pH为2.0～11.0的缓冲溶液中，并放置温度在10℃～60℃，混合30min～30h；所述缓冲溶液中含有磷酸盐和邻苯二胺。

2.根据权利要求1所述的鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，检测所用方法为液相色谱法、高效液相色谱飞行时间质谱法和液相色谱串联质谱法中的一种或二种。

3.根据权利要求1或2所述的鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，包括步骤：

1)制样：将蜂蜜样品溶于pH为4～8的缓冲溶液中，在常温、避光条件下混合10h～24h，蜂蜜样品和缓冲溶液的比例为1～3g：1mL；

2)纯化：步骤1)反应所得溶液经滤膜一次过滤后直接测定，或者再经固相萃取小柱净化和滤膜二次过滤后测定；

3)色谱检测：使用液相色谱紫外或质谱法检测。

4.根据权利要求3所述的鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，步骤2)中，步骤1)所得溶液经微孔滤膜过滤，用于质谱法检测。

5.根据权利要求3所述的鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，步骤2)中，步骤1)所得溶液用微孔滤膜一次过滤、固相萃取小柱净化、微孔滤膜二次过滤后，用于液相色谱紫外检测。

6.根据权利要求3所述的鉴别天然封盖成熟蜂蜜和热加工浓缩蜂蜜的方法，其特征在于，步骤3)所述液相色谱紫外检测中，紫外波长设定为300～330nm。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，液相色谱采用反相色谱柱，所述反相色谱柱为C₁₈，C₈，苯基填充柱中的一种；流动相为乙腈与甲酸水溶液、或甲醇与甲酸水溶液，流速为0.2～1.0mL/min。

8.根据权利要求3～7任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)所述质谱法中，使用电喷雾电离，雾化气温度为250～350℃，雾化气流速为6～12L/min，雾化气压力为30～50psi，鞘气温度为260～350℃，鞘气流速为6-12L/min，电离电压为4000kv，碎片电压为60～175kv。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述质谱法中，扫描方式为正离子模式，采用全扫描以及多反应监测模式。