[发明专利]一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法

说明书

本发明提供了一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法,包括如下步骤：1)将连翘叶粉碎，过40目筛，喷洒适量水至连翘叶粗粉含水量为30％‑60％，控制温度为25～50℃，保温发酵1～3h后烘干；2)将上述连翘叶发酵产物用含醇溶剂提取、减压浓缩、冷藏静置、过滤、水洗涤沉淀、干燥沉淀得连翘脂素含量为30％以上的粗产物；3)将粗产物用非极性或弱极性大孔吸附树脂柱进行纯化，先用10％～40％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，再用50％～80％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，收集50％～80％乙醇淋洗液，减压浓缩干燥，得连翘脂素含量为80％～85％的产物。本发明工艺简单，便于操作，对设备要求低，加工成本低，适用于工业化生产。

技术领域

本发明涉及天然植物提取物领域，具体是一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法。

背景技术

连翘叶为木犀科(Oleaceae)植物连翘[(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)]的干燥叶，是山西省、四川省地方习用药材，具有清热解毒作用，主要用于心烦尿赤，咽喉肿痛，口舌生疮等疾病的治疗。《玉樵医令》记载“连翘叶味苦、微辛、性寒、可泻火，寒能清热，入心肺二经”，《中华本草》记载“连翘茎叶，味苦，性寒，功能主治为：清热解毒，主治心肺积热”。现代研究表明，连翘叶含有连翘脂素、松脂素、连翘苷、芦丁、连翘酯苷I、连翘酯苷A等化学成分。药理学研究已证明连翘叶提取物具有抑菌、抗氧化、保肝、抗疲劳、降血脂、抗衰老等多种生物活性。

连翘脂素是连翘叶中含量较高的主要活性成分连翘苷的苷元，最早是ShizukaKitagawa(1984)等从连翘叶中提取分离出的木脂素类单体化合物。现代研究表明连翘脂素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保肝、降血脂等多种药理活性。连翘脂素虽具有多种药理活性，但因其在连翘叶、果实中的含量不高，因此，目前还没有成熟的转化方法而实现大规模开发利用。近年来，国内外对连翘脂素的制备方法研究已有一些研究，例如，利用微生物将连翘苷转化为连翘脂素、采用纤维素酶水解连翘苷制备连翘脂素，两种制备方法虽然工艺简单，但是需要大量的连翘苷单体，成本较高，很难实现工业化生产。此外，也有报道利用酸碱法处理连翘果实提取物制备连翘脂素的方法，但该方法存在较大环境污染问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法。

所述的连翘脂素制备方法，是以连翘叶为原料，经自然发酵、含醇水溶液提取、大孔树脂分离、结晶、重结晶获得。连翘脂素的含量可达到95％以上，连翘脂素具体制备方法，包括如下步骤：

(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒适量水至连翘叶粗粉含水量为30％～60％，控制温度为25～50℃，保温发酵1～3h后，烘干，得连翘叶发酵产物。

(2)连翘脂素粗产物制备：将上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为70％～90％的含醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤1～3次、干燥，得连翘脂素含量为30～35％的粗产物。

(3)连翘脂素纯化：将连翘脂素粗产物用非极性或弱极性大孔吸附树脂柱进行纯化，首先用10％～40％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，再用50％～80％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，收集50％～80％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为80％～85％的产物。

步骤(1)中所述的连翘叶粗粉含水量优选为50％；发酵温度优选为30℃；保温发酵时间优选为2h。

步骤(2)中所述的70％～90％的含醇水溶液，可为乙醇或甲醇水溶液的任意一种，优选80％乙醇水溶液；沉淀用水洗涤优选为2次。

步骤(3)中所述的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱的材料，可为非极性大孔吸附树脂D₁₀₁或弱极性大孔吸附树脂AB-8的任意一种；淋洗剂优选70％乙醇水溶液。

本发明的有益效果：