[发明专利]高酪蛋白日粮诱导断奶仔猪营养性腹泻模型的建立方法

说明书

本发明涉及一种断奶仔猪营养性腹泻模型，具体涉及高酪蛋白日粮诱导的断奶仔猪营养性腹泻模型，属于动物模型构建领域。给21日龄断奶仔猪持续饲喂15天高酪蛋白日粮，高酪蛋白日粮中酪蛋白是唯一的蛋白来源，酪蛋白的添加量为33.72%，日粮中粗蛋白含量为30%，试验结束后测定仔猪腹泻指标、血清生化指标、肠道结构形态及肠道水通道蛋白标记分子和紧密连接蛋白标记分子表达量。本发明采用了酪蛋白作为唯一蛋白来源，并确定了酪蛋白在日粮中的添加量，建立高酪蛋白日粮诱导的断奶仔猪营养性腹泻模型，为深入探索和预防新生动物发生断奶腹泻提供可靠的模型。

技术领域

本发明属于动物模型构建领域，涉及一种断奶仔猪营养性腹泻模型，具体涉及一种高酪蛋白日粮诱导断奶仔猪营养性腹泻模型的建立方法。

背景技术

我国一直是一个生猪产业大国，每年大致出栏6.9亿头。然而，在现当代养猪生产中，断奶给仔猪的生长带来了巨大的压力，并伴随着胃肠道生理，微生物学和免疫学的显著变化。由于这些变化，断奶后的一段时间内仔猪肠道紊乱，生长性能下降，并极易发生断奶后腹泻。断奶后腹泻带来的生长受阻和肠道疾病是仔猪断奶时期遭受的重大考验，甚至会引起仔猪死亡，给养猪业造成了严重的经济损失，也是养猪业遇到的重大挑战。断奶仔猪的饲养管理在生产中是一个非常重要的环节，也是提高仔猪存活率和生长性能的关键之一。根据引起断奶仔猪腹泻的原因分类，可以将仔猪腹泻分为三大类：病毒性腹泻、细菌性性腹泻和营养性腹泻。其中，由于仔猪断奶后营养摄入不均衡、消化酶系统尚未健全等生理以及环境的影响，使得营养性腹泻成为最常见的腹泻类型，严重影响仔猪的生长性能及存活率。断奶初期，饲料中没有IgA以及其他的免疫因子，且仔猪消化道的重量和体积都较小，消化系统尚未发育完全，减弱了仔猪的免疫功能，使得断奶仔猪肠道对日粮的需求非常敏感。实际生产中，仔猪断奶后，由于受到饲料的营养成分和环境因素变化等原因，常常导致出现以腹泻拉稀为主要特征的营养性腹泻，严重影响仔猪的生长性能及存活率。然而，断奶仔猪营养性腹泻的发病机制十分复杂，近年来，国内外的大量研究表明，仔猪的腹泻与断奶后的营养存在着密切关系。因而研究建立断奶仔猪营养性腹泻模型来研究营养性腹泻的具体机制可以对我国由于断奶腹泻引起的较高死亡率起到一定的缓解作用，对我国畜牧业发展具有重要的意义。

营养性腹泻(post-weaning nutritional diarrhea,PWND)常发生在仔猪断奶期间，表现为食欲下降、消化功能紊乱、体重减轻、腹泻，伴随着水养性粪便，严重时可引起仔猪的死亡。一方面断奶后发生营养性腹泻，对仔猪的小肠结构和功能都造成了很大的损伤。大约 95％的肠上皮细胞存在于绒毛和隐窝中，分泌相关消化酶体。长的绒毛和浅的隐窝一起增加小肠消化吸收的表面积，而断奶会造成绒毛和隐窝的损伤，使得绒毛变短，隐窝加深。不同的营养物质引起绒毛和隐窝损伤的机制不同，例如饲料中蛋白质的种类和含量而不是蛋白质的水解影响回肠的绒毛长度和隐窝深度。在仔猪断奶日粮中添加一定水平的大豆蛋白，会使得仔猪肠道绒毛变短，隐窝加深，并引起营养性腹泻增加了断奶后仔猪的死亡率。而使用一定水平的喷雾干燥血浆蛋白粉作为日粮蛋白质来源，则对仔猪的肠道发育有促进作用。并且，断奶后小肠对于饲料的消化吸收能力大大降低，容易造成未吸收的食物残留，过度发酵而产生多种病原菌，引起营养性腹泻。另一方面，有文献证明，大肠功能的改变，跟断奶后腹泻息息相关。断奶后饲料刺激减少了仔猪大肠隐窝的密度并且增加了盲肠的有丝分裂，也短暂的减弱了结肠的吸收能力。断奶后由于饲料的刺激，小肠吸收能力减弱，过剩的水和电解质转移到大肠，而大肠功能受损，无法全部吸收，因此导致严重的腹泻出现。

由于大多数动物饲料中所需植物蛋白还有抗营养因子，仔猪断奶时，一般其消化系统尚未发育完全，蛋白酶分泌不足，对于蛋白质的消化能力极低。添加高水平蛋白含量饲料，未消化完全的蛋白质在小肠中积累引发炎症，而后进入大肠继续发酵，产生大量的腐胺等毒性胺类物质。同时加速了肠道的蠕动和分泌，减弱了结肠对水分的吸收，损伤了仔猪的肠道功能，引起腹泻。使得植物蛋白的利用受到了极大的限制，因此建立以酪蛋白为唯一蛋白来源诱导PWND的模型，研究蛋白质水平对于断奶仔猪断奶时期，胃肠道的生理功能和肠道健康的功能，可以创造有助于缓解目前我国蛋白资源的匮乏条件下，最大程度降低PWND，创造更高的经济效益。