[发明专利]呕吐毒素半抗原及其制备方法、人工抗原、试剂盒及呕吐毒素的检测方法

说明书

本发明涉及一种呕吐毒素半抗原及其制备方法、人工抗原、试剂盒及呕吐毒素的检测方法。其中，所述呕吐毒素半抗原的化学结构式(Ⅰ)如下：

技术领域

本发明涉及酶联免疫检测技术领域，特别是涉及一种呕吐毒素半抗原及其制备方法、人工抗原、试剂盒及呕吐毒素的检测方法。

背景技术

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DeoxynivaLenol)又称呕吐毒素(Vomitoxin)，其属于霉菌的单端孢菌素族，由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实样本中，含量通常是mg/kg级，由于其具有高的细胞毒素及免疫抑制性质，对人类及动物构成了健康威胁。

传统的呕吐毒素的主要检测方法有薄层色谱法、高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)，以及高效液相色谱-质谱检测法(HPLC-MS)，上述方法均存在检测限太低，设备操作复杂等问题。

发明内容

基于此，有必要提供一种快速、准确、方便的呕吐毒素半抗原及其制备方法、人工抗原、试剂盒及呕吐毒素的检测方法。

一种呕吐毒素半抗原，所述呕吐毒素半抗原的化学结构式(Ⅰ)如下：

上述呕吐毒素半抗原为人工构建的新型呕吐毒素半抗原，该抗原最大程度保留了呕吐毒素的官能团的结构特征，经此半抗原制备得到的呕吐毒素人工抗原能够发挥出最佳的构效优势，从而得到特异性强的抗体。

本发明还提供一种呕吐毒素半抗原的制备方法，其包括如下步骤：在pH为2.8-3.2下，将呕吐毒素和对肼基苯甲酸盐酸盐反应。

上述制备方法简单，在pH为2.8-3.2下，将对肼基苯甲酸盐酸盐加入呕吐毒素中反应制备人工半抗原，对肼基苯甲酸盐酸盐起到间隔臂作用，还能够防止大分子载体蛋白对半抗原的屏蔽效应，即在半抗原与载体结合时阻止抗原决定簇被包埋在卷曲凹陷的大分子结构中，不会对呕吐毒素分子抗原决定簇的结构造成不利影响，抗原决定簇的完全外露可以高效产生对应抗体。

其中一个实施例中，所述呕吐毒素与所述对肼基苯甲酸盐酸盐的质量比为295-300:185-200。

本发明还提供一种呕吐毒素人工抗原，所述人工抗原为本发明所述的呕吐毒素半抗原与第一载体蛋白的偶联物。

其中一个实施例中，所述第一载体蛋白为活化牛血清白蛋白。

本发明还提供一种呕吐毒素酶联免疫试剂盒，其包括采用本发明所述的人工抗原为免疫原得到的抗体。

其中一个实施例中，还包括包被有包被原的酶标板。

其中一个实施例中，所述包被原包括本发明所述的呕吐毒素半抗原与第二载体蛋白的偶联物。

其中一个实施例中，所述第二载体蛋白为卵清蛋白。

本发明还提供一种呕吐毒素的检测方法，其包括如下步骤：

将待测样本进行前处理；

用本发明任一实施方式中所述的呕吐毒素酶联免疫试剂盒对经过前处理的待测样本进行酶联免疫法检测；以及

分析检测结果。

本发明呕吐毒素酶联免疫试剂盒检测灵敏、准确、快速，操作简便、特异性强，适用于大批样品的检测。

具体实施方式