[发明专利]化合物cytorhizins B和C及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明公开了化合物cytorhizin B和cytorhizin C及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。所述的化合物cytorhizin B和cytorhizin C是从巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物中分离制备得到。经试验证实，本发明的化合物cytorhizins B和cytorhizin C具有抗肿瘤活性。因此，本发明为研究与开发新的抗肿瘤药物提供了候选化合物，为开发利用植物内生微生物来源的天然活性物质提供了科学依据。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及化合物cytorhizin B和cytorhizin C及其制备 方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

植物内生真菌(endophytic fungi)是指生活史的一定阶段或全部阶段生活在健康植物组 织内，但不对植物组织引起明显病害症状的真菌(Tan RX and Zou WX,2001)。内生真菌 物种丰富多样，它们处于植物内部的特殊环境中，能够产生各种结构的次生代谢产物，其 化合物的结构类型远远超出其植物代谢产物的范围，容易从中发现新颖结构的化合物，并 且具有多种生物活性，因此内生真菌已成为发现新天然活性物质的重要资源，在农业和医 药工业中具有重要的应用潜力(施琦渊等，2007)。

巴戟天(Morinda officinalis)为茜草科多年生攀援木质藤本植物，是我国著名的四大南 药之一，有补肾壮阳、强筋骨、祛风湿的作用，用于阳痿遗精、宫冷不孕、月经不调、少 腹冷痛、风湿痹痛、筋骨痿软等症(国家药典委员会，2000)。现代研究表明，巴戟天含有蒽醌类、环烯醚萜苷萜、有机酸类、糖类、甾醇类(林美珍等，2010)。现代药理研究 表明，巴戟天具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、消炎镇痛等广泛药理作用(徐吉银等，2006)。 因此，从巴戟天内生真菌发现的具有抗肿瘤活性作用的新化合物cytorhizin B和cytorhizin C 可为新药研发提供化学实体。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种具有抗肿瘤活性的化合物cytorhizin B和cytorhizin C。

本发明的化合物cytorhizin B和cytorhizin C，其结构式如式(I)中所示：

本发明的第二个目的是提供化合物cytorhizin B和cytorhizin C的制备方法，所述的化 合物cytorhizin B和cytorhizin C是从巴戟天内生真菌Cytospora rhizophoraeA761的发酵培 养物中分离制备得到，具体包括以下步骤：

(1)制备巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物，分离菌丝体和发 酵液，发酵液经大孔树脂D101柱，先用水洗掉培养基残渣，再用体积分数95％乙醇水溶液 等度洗脱，收集95％乙醇水溶液洗脱的组分，减压浓缩得浸膏；

(2)将步骤(1)得到的浸膏经C₁₈反相柱层析，用甲醇-水作为洗脱剂，从体积比60:40 至100:0梯度洗脱，收集甲醇-水体积比为60:40洗脱下来的馏分Fr.2；Fr.2经硅胶柱层析， 以正己烷：乙酸乙酯的体积比为20:1,10:1,5:1,2:1,1:1,0:1进行梯度洗脱，经TLC板合并 相同主点得到9个流分，分别为Fr.2-1-Fr.2-9，收集正己烷：乙酸乙酯体积比5:1洗脱的且 经TLC以展开剂为正己烷：乙酸乙酯＝5:1v/v，rf值为0.3-0.6的组分Fr.2-6；收集正己烷： 乙酸乙酯体积比5:1洗脱的且经TLC以展开剂正己烷：乙酸乙酯＝5:1v/v，rf值为0.2-0.3 的组分Fr.2-7；