[发明专利]一株假单胞菌及其在石油降解中的应用

说明书

本发明公开一株假单胞菌Pseudomonadaceae sp.GR5，已于2018年7月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址，中国，武汉，武汉大学，保藏号CCTCC M 2018488。以库尔勒塔中油田污染土壤中筛选得到，菌株GR5呈球杆状，革兰氏结果呈阴性，经16sRNA鉴定为假单胞菌。经过人工驯化将该菌种驯化到原油浓度高达60g/L时依然能够正常生长繁殖。本发明的石油降解菌在最适温度30℃，最佳PH7.0的条件下降解20天，对含原油20g/L的液体培养基中原油降解率达到84.4%，原油降解率极高，具有很大的应用前景。可以应用于微生物修复去除土壤和水体环境中的原油污染等领域。

技术领域

本发明涉及一种假单胞菌GR5及其在石油降解中的应用。

背景技术

在原油的开采、炼制、运输和使用过程中，不可避免的会发生石油的泄露，进入环境造成污染。对河流、土壤、地下水以及海洋等环境造成严重污染。在陆地，原油污染一般由开采钻屑油泥、输油管道破裂等造成；在海洋中，油井溢油、油船泄露造成。据统计全世界平均每年有600-1000万吨原油通过各种途径进入环境。之后通过物理化学作用方式向周围扩散至更大范围。原油的化学组成复杂，包括烷烃、环烷烃、芳香烃、沥青质等多种物质有毒物质。其中一些多环芳烃具有致癌、致畸、致突变作用，其可以通过食物链最终进入人体，危害人类健康。

目前，石油污染的去除方法主要有三种：物理方法、化学方法和生物方法。物理方法主要是焚烧法、隔离法和换土法，成本高，不能将污染物完全去除。化学方法主要是萃取法、洗涤法和化学氧化法，污染物去除不彻底，容易引起二次污染。生物方法是指利用生物的生命代谢活动降解石油污染物（主要是微生物），其处理效果好、成本低、对环境影响较小，具有较好的应用前景。

虽然,生物法治理石油污染环境已经有了大量的研究，但是，目前，应用于石油污染处理的降解菌生长速率缓慢、降解率低，降解速率缓慢，不能达到理想的降解效果。为了取得高效、彻底的生物修复效果，分离和筛选石油污染物的高效降解菌的生物修复的必然要求。

发明内容

本发明的一个目的是在于提供一株降解石油烃的菌株GR5(假单胞菌Pseudomonassp. GR5),已于2018年7月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址，中国，武汉，武汉大学，保藏编号CCTCC N0:M2018488。

本发明的目的在于提供上述石油降解菌GR5的应用。

所述应用具体为将Pseudomonadaceae sp. GR5菌液直接投加到石油污染的水体或者土壤中；或将Pseudomonadaceae sp. GR5固定到载体上制备成菌剂，再将菌剂施用到石油污染的水体或者土壤中。

本发明的另一个目的是提供一种降解石油烃的固体菌剂，所述固体菌剂的活性成分包括菌株GR5，保藏号CCTCC M 2018488。

所述固体菌剂为将Pseudomonadaceae sp. GR5固定到载体上制备成的菌剂。

进一步地，所述载体为玉米秸秆，粉碎粒径≤200微米的无菌秸秆。

进一步地，所述载体的处理方法为高压蒸汽灭菌处理，将灭菌后的秸秆于40-50℃烘干至恒重，粉碎机粉碎过40目筛，在蒸馏水中浸泡2h，调节pH7-8，至于40-50℃烘干至恒重。

进一步地所述菌剂中Pseudomonadaceae sp. GR5有效活菌数与秸秆比例为0.5ｘ10⁹-2ｘ10⁹个/克。