[发明专利]一种快速降解水体枯落叶的方法

权利要求书

1.一种快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：包括：

(1)原材料准备：准备能够分解纤维素的真菌菌种；准备Mandel营养液；准备羧甲基纤维素平板培养基；准备马铃薯葡萄糖琼脂培养基；准备马铃薯葡萄糖液体培养基；准备能够分解木质素的细菌菌种；准备LB固体培养基；准备LB液体培养基；

(2)PP生物填料球固定产木质素和纤维素酶的真菌和细菌：

产纤维素酶真菌培养：将所述真菌菌种接种到所述羧甲基纤维素平板培养基上，培养3-5d后，挑取长势好的菌丝到新的所述羧甲基纤维素平板培养基上，重复此操作2-3次后将所得菌种接种到所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养基上，28℃恒温培养箱培养3-5d，再将所得菌种接种到马铃薯葡萄糖液体培养基，28℃恒温培养箱培养3-5d，获得真菌菌液；

产木质素酶细菌培养：将所述细菌菌种接种所述LB固体培养基上，37℃下培养24h后挑选长势好的菌落，接种到新的所述LB固体培养基上，重复此操作2-3次后，将所述菌落接种到所述LB液体培养基上，培养24-48h，获得细菌菌液；

PP生物填料球固定菌：将PP生物填料球放入所述真菌菌液，28℃再培养4-6d，获得附着所述真菌菌种的生物填料球；将PP生物填料填料球放入所述细菌菌液，37℃下再培养3-5d，获得附着有所述细菌菌种的生物填料球；

(3)水样处理：先在水底铺好曝气装置，加入附着有所述真菌菌种的PP生物填料球；待其自然下沉后打开所述曝气装置，将曝气强度调最小值；5d后，加入附着有所述细菌菌种的PP生物填料球；曝气装置间隔1-2d开22-26h，持续2-3个月。

2.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：所述真菌菌种包括棘孢曲霉、尖孢镰刀酶、间型腐霉和木霉中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：所述细菌菌种包括枯草芽孢杆菌菌属、蜡样芽孢杆菌属和绿针假单胞菌中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：还包括所述PP生物填料球的预处理：所述PP生物填料球先用酒精浸泡6h，取出晾干备用。

5.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：所述Mandel营养液：按重量份数计，包括NaNO₃ 2份，K₂HPO₄ 1.5份，CaCl₂ 1.5份，MgSO₄ 0.3份，FeSO₄·7H₂O0.005份，MnSO₄·H₂O 0.0016份，ZnSO₄·H₂O 0.0014份，CoCl₂ 0.0005份，H₂O 100份；pH5.5。

6.根据权利要求5所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：所述羧甲基纤维素平板培养基：包括所述Mandel营养液，2％的羧甲基纤维素，0.08％的脱氧胆酸钠，1.5％的琼脂，121℃灭菌20min；冷却至不烫手后倒平板，平板凝固后倒置备用。

7.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：准备所述LB固体培养基：按重量份数计，包括胰蛋白胨10份，酵母粉5份，氯化钠10份，琼脂粉10-15份，蒸馏水1000份；调pH为7.0，121℃灭菌20min，冷却至不烫手后倒平板，凝固后倒置待用。

8.根据权利要求1所述的快速降解水体枯落叶的方法，其特征在于：准备所述LB液体培养基：按重量份数计，包括胰蛋白胨10份，酵母粉5份，氯化钠10份，琼脂粉10-15份，蒸馏水1000份，pH为7.0，121℃灭菌20min，4℃放置备用。