[发明专利]新的噬菌体、其组合物以及它们的制备方法和应用有效
申请号: | 201910057652.1 | 申请日: | 2015-06-09 |
公开(公告)号: | CN109735508B | 公开(公告)日: | 2023-04-28 |
发明(设计)人: | 霍茨蒙德·曼德维尔 | 申请(专利权)人: | 菲吉乐科(南京)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K35/76;A61P31/04;C12R1/92 |
代理公司: | 北京市隆安律师事务所 11323 | 代理人: | 刘东方 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 噬菌体 组合 以及 它们 制备 方法 应用 | ||
1.噬菌体,其特征在于,所述噬菌体为长尾噬菌体BP-12(Chilikevirussp.BP-12),其中长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)保藏编号为CCTCC NO:M 2015141。
2.根据权利要求1所述的噬菌体,其特征在于,所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirussp.BP-12)的全基因组核苷酸序列为SEQ ID NO:3。
3.根据权利要求1或2所述的噬菌体,其特征在于,所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)不含表6所记载的毒力基因或不良基因。
4.根据权利要求1或2所述的噬菌体,其特征在于,所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)不识别表9中长尾噬菌体BP-12所不识别的57株非致病性细菌。
5.根据权利要求1或2所述的噬菌体,其特征在于,所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)不识别表10中长尾噬菌体BP-12所不识别的184株非宿主性致病性细菌。
6.权利要求1-5任一所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)在制备裂解沙门氏菌的产品中的应用,其特征在于,所述的沙门氏菌是指表7中22株能够被长尾噬菌体BP-12裂解的沙门氏菌或表8中24株能够被长尾噬菌体BP-12裂解的沙门氏菌。
7.权利要求1所述长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)的发酵方法:
2-1)取长尾噬菌体BP-12(Chilikevirus sp.BP-12)的宿主菌落,接种到LB培养液中振荡得到宿主菌悬液;
2-2)将菌悬液稀释转接到LB培养液,振荡培养;
2-3)调节LB培养液的初始pH值使得长尾噬菌体BP-12的发酵初始pH值为6;
2-4)采用火焰接种法接种,向初始pH值为6的LB培养液中分别接入噬菌体和对数期宿主菌悬液并发酵,发酵过程中通入无菌空气,并加入消泡剂;
2-5)发酵结束后,将噬菌体与宿主菌的全部混合液取出并离心,上清液经真空抽气泵抽滤至无菌过滤器装置内,得到噬菌体发酵液并于4℃下保存,即得。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述LB培养液的配方为:胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠10g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。
9.一种噬菌体组合物,其特征在于,所述组合物包括长尾噬菌体BP-12(Chilikevirussp.BP-12)、保藏编号为CCTCC NO:M 2015141和肌尾噬菌体BP-63(Myoviridae sp.BP-63)、保藏编号为CCTCC NO:M 2015145的组合。
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