[发明专利]核型分析专用制备高分辨染色体染液有效
申请号: | 201910061347.X | 申请日: | 2019-01-23 |
公开(公告)号: | CN109540633B | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 李存玺;刘恒涛;刘舒;李能干 | 申请(专利权)人: | 北京仁基源医学研究院有限公司;李存玺;刘恒涛;刘舒 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 北京中知法苑知识产权代理有限公司 11226 | 代理人: | 常玉明;张兰海 |
地址: | 100176 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核型 分析 专用 制备 分辨 染色体 染液 | ||
1.核型分析专用制备高分辨染色体染液,它是由下述配比的原料制备而成:
吉姆萨染粉1-3g、甘油66-69ml、甲醇66ml,分散剂1-10ml;
所述的染液是由下述方法制备而成:
(1)将吉姆萨染粉和少部分甘油混合,避光连续研磨2小时;
(2)研磨中,对吉姆萨染粉颗粒进行检测合格;
(3)将研磨检测合格的吉姆萨混合液,移入到100ml棕色瓶中,加入剩余的甘油,然后58℃避光孵育2小时;
(4)然后移入500ml棕色瓶中,加入甲醇和分散剂充分混匀;密封、避光、室温保存2周;
(5)质量检验:使用吸管取染液滴到干净载玻片上,用自来水轻轻冲洗2-5秒;观察染液颜色,颜色为蓝色,不易着色,显带不均匀,为不合格;颜色为紫色,染液为合格;
其特征在于:所述的分散剂为有机硅流平剂;
上述第(2)步研磨中吉姆萨染粉颗粒进行检测,直径均值d1≤2.12μm,方为合格。
2.根据权利要求1所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液,其特征在于:它是由下述配比的原料制备而成:
吉姆萨染粉1g、甘油66ml、甲醇66ml、分散剂1-10ml。
3.根据权利要求1或2所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液,其特征在于:所述的甲醇为分析纯甲醇。
4.根据权利要求1或2所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液,其特征在于:所述对吉姆萨染粉颗粒进行检测方法为:
步骤1、手工质量检测:取研磨混合液10μl涂在手套上捻开,肉眼可见颗粒,且手指捻触到颗粒存在,则研磨不充分,需继续研磨,直至捻摸不到颗粒存在为止;
步骤2、显微镜下质量检测:捻摸不到颗粒存在后,在100倍油镜下,随机选择20个视野,计数并测量视野下每个染粉颗粒的直径,直径均值d1≤2.12μm,方为合格。
5.根据权利要求3所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液,其特征在于:所述对吉姆萨染粉颗粒进行检测方法为:
步骤1、手工质量检测:取研磨混合液10μl涂在手套上捻开,肉眼可见颗粒,且手指捻触到颗粒存在,则研磨不充分,需继续研磨,直至捻摸不到颗粒存在为止;
步骤2、显微镜下质量检测:捻摸不到颗粒存在后,在100倍油镜下,随机选择20个视野,计数并测量视野下每个染粉颗粒的直径,直径均值d1≤2.12μm,方为合格。
6.权利要求1所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液性能验证方法,其特征在于:
采用G带染色技术试验染液:
A、1号缸:将烤好的人外周血检测样品载玻片置入胰酶混合液中,37℃消化;
B、2号缸:终止胰酶处理;
C、3号缸:3号缸内盛有50ml染液缓冲液,加入1ml所述的染液,混匀,37℃染色2-10min;
D、吹干玻片,滴加封片剂,盖上盖玻片,观察染色体显带效果,显带染色体结果无毛刺,深浅带清晰,方为染液性能合格;
E、在棕色瓶上标记完整的信息:包括配制日期,总体积量,实验员,并登记入数据库。
7.根据权利要求6所述的核型分析专用制备高分辨染色体染液性能验证方法,其特征在于:所述的染液缓冲液的配比原料:十二水合磷酸氢二钠1-3g/L,磷酸二氢钾0.4-0.6g/L;染液缓冲液pH值为7.0-7.5。
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