[发明专利]基于碳量子点检测酸性磷酸酶活性的荧光分析方法

权利要求书

1.一种基于碳量子点检测酸性磷酸酶活性的荧光分析方法，其特征在于，包括如下步骤：配置含有不同浓度酸性磷酸酶的缓冲溶液、加入碳量子点和多巴胺进行孵育反应，测定碳量子点的荧光来检测酸性磷酸酶活性。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碳量子点（CDs）是由2g柠檬酸和0.6g谷胱甘肽熔融后加入8 mL多乙烯多胺反应90 min制备得到的。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述CDs的最大激发波长为350 nm，发射波长为452nm。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对反应时间10、20、40、60、80、100、120min和反应温度25、30、37°C进行优化。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对缓冲溶液的类型进行优化，其中缓冲溶液为pH6.0的PBS、Tris-HCl、NaAC-HAC。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对PBS缓冲液的pH进行优化，其中pH值为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对底物DA的浓度进行优化，其中DA浓度为0、10、30、50、100、200、300、400、500、600、700μM。

8.如权利要求4-7任一所述的方法，其特征在于，选取100min作为最优反应时间，25℃作为最优反应温度，400μM DA作为最优底物浓度，10mM pH 7.0的PBS作为反应体系的缓冲溶液。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸性磷酸酶浓度为0、1、5、10、20、30、40、50、60、80、100、150、200、250、300、400、500U/L。

10.一种酸性磷酸酶的定量检测方法，通过荧光分光光度法对加入不同浓度酸性磷酸酶的碳量子点进行荧光检测，其特征在于，所述荧光分光光度法中使用的溶液由PBS、CDs、酸性磷酸酶和多巴胺混合而成；通过所述荧光分光光度法绘制的吸收光谱曲线方程为：Y=16.0251+2.52176X，R²=0.99312，其中Y为CDs的荧光淬灭值；X为酸性磷酸酶的活性浓度，最低检测限（LOD）=0.45 U/L；所述溶液中CDs的浓度为25μg/mL。