[发明专利]一株高效解磷真菌小孢根霉及其筛选方法与应用

说明书

一株高效解磷真菌小孢根霉及其筛选方法与应用，属于微生物学领域。针对如何降解土壤中无机磷、促进作物生长的问题，本发明提供了一株高效解磷真菌小孢根霉(Rhizopus microsporus)NEAU‑8，其保藏编号为：CGMCC NO.14635。其筛选方法如下：1)取小麦根际土壤，加入体积分数为0.85％的生理盐水富集培养后，静置；2)取上清液进行梯度稀释，取各稀释液，分别涂布在无机磷固体培养基上进行培养；3)将每个培养基上出现有透明圈的微生物挑取出，接种到于新的无机磷固体培养基培养；4)分别将培养的菌体制成孢子悬液，接种到无机磷液体培养基中培养，测定菌液中可溶性磷的含量，筛选获得高效解磷的真菌小孢根霉。本发明获得真菌小孢根霉可用于农业生产中。

技术领域

本发明属于微生物学领域，具体涉及一株高效解磷真菌小孢根霉及其筛选方法与应用。

背景技术

磷是植物生长发育所必需的三大营养元素之一，是植物细胞中遗传物质和能量物质等有机化合物的基本构成元素，植物的光合作用和体内的生化代谢过程都必须有磷参加，磷在植物的整个生命过程中起着不可替代的作用。据报道，我国74％的耕地土壤中缺乏磷，土壤中约95％的磷以无效磷的形式存在，不能被植物吸收利用。因此，磷成为限制作物生长和产量的主要元素之一。为了减缓磷匮乏对植物生长的影响，农业生产上主要依靠施用磷肥来增加磷素供应。然而，施入土壤中的磷肥大部分会与土壤中的金属离子如Al³⁺、Fe³⁺、Ca³⁺等结合形成难溶性磷酸盐，导致当年磷的利用率仅为10-25％。为满足农作物对磷的需求，农业生产中往往会大量施加磷肥，而磷肥的过量施用不仅会造成严重的经济损失，使土壤中微生物多样性下降，还会造成土壤板结、地力衰退、环境污染、生态恶化和农产品品质下降等环境问题，因此，如何有效利用土壤中的无效态磷，提高磷肥的利用率，对减少农业生产中化肥的使用和资源消耗，以及保护生态环境具有十分重要的意义。

解磷微生物能够溶解土壤中的不溶性磷，将无效磷转变成植物能吸收的有效磷，并能通过产胞外酶和有机酸来刺激植物的生长。解磷微生物可以分为解磷细菌、放线菌和真菌，其中解磷细菌研究的比较多，包括肠细菌属(Enterbacter)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、欧文氏菌属(Erwinia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙雷氏菌属(Serratia)、黄杆菌属(Flavobacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、微球菌属(Micrococcus)、固氮菌属(Azotobacter)、色杆菌属 (Chromabacterium)、沙门氏菌属(Salmonella)、产碱菌属(Alcaligenes)、节细菌属(Arthrobacter)、硫杆菌属(Thiobacillus)、埃希氏菌属(Escherichia)；解磷放线菌主要侧重于链霉菌属(Streptomyces)；解磷真菌方面的相关研究报道不多，大多为曲霉属(Aspergillus)、根霉属 (Rhizopus)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)、小菌核菌属(Sclerotium)、AM菌根菌 (Arbuscular mycorrhiza)等。很多解磷细菌和放线菌在传代培养后会丧失其最初的解磷能力，且这种丧失是不能再恢复的。

发明内容

针对如何降解土壤中无机磷、促进作物生长的问题，本发明提供了一株高效解磷真菌小孢根霉(Rhizopus microsporus)NEAU-8，其保藏编号为：CGMCC NO.14635。

本发明还提供了上述小孢根霉的筛选方法，方法如下：

1)取小麦根际土壤，加入0.85％的生理盐水富集培养后，静置15-30min；所述土壤与生理盐水的比例为1:9(g/mL)；

2)然后取1mL上清液进行梯度稀释，取每一个稀释度的稀释液，分别涂布在无机磷固体培养基上进行培养；

3)将每个培养基上出现有透明圈的微生物挑取出，接种到新的无机磷固体培养基上培养；