[发明专利]经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽或蛋白类免疫原免疫原性中的应用

说明书

本发明涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球的新用途，具体涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽或蛋白类免疫原免疫原性中的应用。经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球上的碘代乙酰基可特异并高效的与多肽或蛋白类免疫原的巯基(‑SH)发生不可逆的反应，生成共价结合的多肽‑琼脂糖树脂复合物或蛋白‑琼脂糖树脂复合物，该复合物具有较高的分子量，较大的异质性和难于降解性，可极大提高多肽或蛋白类免疫原的免疫原性。

技术领域

本发明涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球的新用途，具体涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽或蛋白类免疫原免疫原性中的应用。

背景技术

抗体(antibody)是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。用于制备抗体的免疫原可以是蛋白、多肽或核酸等，由于小分子蛋白或多肽抗原性较差，单一免疫很难产生良好的免疫反应，只有和适当的载体和佐剂结合才能达到理想的效果。载体可以提高抗原的免疫原性，增强动物机体的免疫反应；佐剂除了提高抗原的免疫原性外，还可以延长抗原的时效。

目前，较为常用的抗原载体有：蛋白类的牛血清白蛋白(BSA)、血蓝蛋白(KLH)、卵清白蛋白(OVA)等；多肽类聚合物的多聚赖氨酸；大分子聚合物和某些颗粒，如聚乙烯吡咯烷酮、活性炭、羧甲基纤维素等。目的蛋白或多肽与活化的载体交联后，得到免疫原。另一类较为常用的方法是，将目的蛋白或多肽与某种大分子量标签蛋白进行融合表达。两种方法的目的都是通过增加抗原的分子量来增强机体的免疫反应。

发明内容

本发明的目的在于提供经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球的新用途。

实际上本发明涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽或蛋白类免疫原免疫原性中的应用。

还涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽α-syn免疫原性中的应用。

还涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高多肽Olfr560免疫原性中的应用。

还涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高蛋白HSP90α免疫原性中的应用。

还涉及经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球在提高蛋白eNOS免疫原性中的应用。

本发明涉及的经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球上的碘代乙酰基可特异并高效的与多肽或蛋白类免疫原的巯基(-SH)发生不可逆的反应，生成共价结合的多肽-琼脂糖微球复合物或蛋白-琼脂糖微球复合物，该复合物具有较高的分子量，较大的异质性和难于降解性，可极大提高多肽或蛋白类免疫原的免疫原性。

另外，经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球与多肽或蛋白类免疫原的结合速度很快，与多肽类免疫原的结合，2小时内就可完成；与蛋白类免疫原的结合， 3.5小时内就可完成。而且，只需将多肽或蛋白类免疫原与经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球混合，静止状态下即可进行结合，省时省力；经碘代乙酰基活化的琼脂糖微球还具有较高的结合力，减少了免疫原的液体体积；而且该活化的琼脂糖微球与蛋白类免疫原的交联条件宽泛，在pH7.2-9.0之间都可进行；反应液可为水溶液、有机溶剂或变性剂。

原核表达的异源蛋白，经常以包涵体形式存在，这时需要将包涵体用变性剂溶解后去免疫。而该活化的琼脂糖微球与变性剂的兼容性，使得包涵体蛋白的交联成为可能。

附图说明

图1为本发明实施例一以琼脂糖微球为载体的Western Blot检测结果条带图；

图2为本发明实施例一以KLH为载体的Western Blot检测结果条带图；

图3为本发明实施例二以琼脂糖微球为载体的Western Blot检测结果条带图；

图4为本发明实施例二以KLH为载体的Western Blot检测结果条带图；