[发明专利]芽孢杆菌DL-2的胞外蛋白酶在催化(±)-乙酸苏合香酯不对称水解中的应用

权利要求书

1.芽孢杆菌Bacillus sp.DL-2所产的胞外蛋白酶在催化(±)-乙酸苏合香酯不对称水解中的应用；所述的芽孢杆菌Bacillus sp.DL-2，其保藏编号为：GDMCC 1.1556。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的胞外蛋白酶为固定化的胞外蛋白酶。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的固定化的胞外蛋白酶是通过以下方法制备的：将芽孢杆菌Bacillus sp.DL-2接种到液体培养基中进行发酵培养，得到发酵液，离心取上清液得到粗酶液，按每100mL的粗酶液加入5g硅藻土的量加入硅藻土，经吸附、抽滤、干燥后得到固定化的胞外蛋白酶。

4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述的芽孢杆菌Bacillus sp.DL-2所产的胞外蛋白酶在催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(R)-1-苯乙醇中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(R)-1-苯乙醇是在金属离子、表面活性剂或有机溶剂存在环境下进行的。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的金属离子为K⁺、Ca²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Al³⁺或Fe³⁺；所述的表面活性剂为三聚磷酸钠；所述的有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺或正丙醇。

7.根据权利要求5所述的应用，所述的催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(R)-1-苯乙醇的反应体系为：包括360mg/mL固定化的胞外蛋白酶、5mM底物(±)-乙酸苏合香酯和2mM Mn²⁺，其余为pH6.5的磷酸钠缓冲液；反应条件为：20℃反应2h。

8.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述的芽孢杆菌Bacillus sp.DL-2所产的胞外蛋白酶在催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(S)-乙酸苏合香酯中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(S)-乙酸苏合香酯是在金属离子存在环境下进行的；所述的金属离子为Ca²⁺或Mg²⁺。

10.根据权利要求9所述的应用，所述的催化拆分(±)-乙酸苏合香酯得到(S)-乙酸苏合香酯的反应体系为：包括440mg/mL固定化的胞外蛋白酶、2.5mM底物(±)-乙酸苏合香酯和2mM Ca²⁺或Mg²⁺，其余为pH7.5的磷酸钠缓冲液；反应条件为：35℃反应10h。