[发明专利]一种大肠杆菌检测试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及水质微生物检测技术领域，公开了一种大肠杆菌检测试剂盒及其制备方法和应用。本发明所述试剂盒包括裂解液和检测试纸条；所述裂解液由脱水剂、渗透剂和表面活性剂组成，其中所述脱水剂为氯化钠、EDTA‑2Na或氢氧化钠；所述渗透剂为甘油、聚乙二醇2000、吐温80或曲拉通‑100；所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮或乙基纤维素；所述检测试纸条的一端有显色块，所述显色块含有X‑GAL。本发明以干化学试纸方法，利用大肠杆菌裂解释放半乳糖酶，与半乳糖苷显色剂(X‑GAL)反应显蓝色来制作干化学试纸，结合本发明特有的快速裂解液可将整个检测过程缩短至30min以内，相比现有产品至少24小时的检测时间，显著提高了水质和食品中大肠杆菌的检测效率。

技术领域

本发明涉及水质微生物检测技术领域，具体涉及一种大肠杆菌检测试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

大肠埃希氏菌通常被称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌，大小0.5×1～3微米，周生鞭毛，能运动，无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴，几乎占粪便干重的1/3。

国家规定，每毫升饮用水中的菌落总数小于100，每100毫升水中不得检出总大肠杆菌群。

大肠菌群数是污水水质分析中常用的细菌学指标，用每升水中的大肠菌群数表示。大肠菌群包括大肠杆菌等几种大量存在于人体肠道中的细菌，因此粪便中大量存在大肠菌群。在一般情况下，大肠菌群属于非致病菌。如在水样中检测出大肠菌群，表明水被粪便所污染。由于水致传染病菌和病毒的生长环境与大肠菌群基本相同，而对水致传染病菌和病毒的检测又比较困难，因此通常用大肠菌群作为间接的检测指标。如果水中的大肠菌群数超过规定的指标，就认为这些水中可能含有水致传染病菌和病毒，如人体直接接触这些水就可能会被传染上疾病。

目前市场上有水质粪大肠菌群检验纸片、大肠杆菌O157:H7快速检测试纸条。此两种产品使用过程中都需要采样，利用恒温培养箱培养24小时，不仅操作不方便，而且检测时间长(大于24小时)，两种产品均是利用微生物检测(国标)方法原理制备。而且上述产品使用领域局限性大，只能用于食品、餐具表面微生物测试，或者致病性大肠杆菌的测试，不具备普遍适用性。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种大肠杆菌检测试剂盒及其制备方法，使得所述试剂盒能够快速检测水质或食品中是否存在大肠杆菌污染，并可应用于水质或食品大肠杆菌的检测中。

为了实现上述发明目的，本发明提供了如下技术方案：

一种大肠杆菌检测试剂盒，包括裂解液和检测试纸条；

所述裂解液由脱水剂、渗透剂和表面活性剂组成，其中所述脱水剂为氯化钠、EDTA-2Na或氢氧化钠；所述渗透剂为甘油、聚乙二醇(优选聚乙二醇2000)、吐温(优选吐温80)或曲拉通-100；所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮(优选K30)或乙基纤维素；

所述检测试纸条的一端有显色块，所述显色块含有X-GAL。

作为优选，所述脱水剂的质量百分比浓度为0.1-30％，更优选为1-2％；所述渗透剂的质量百分比浓度为0.1-10％，更优选为0.1-0.2％；所述表面活性剂的质量百分比浓度为0.01-5％。在本发明具体实施方式中，所述脱水剂的质量百分比浓度为1％或2％，所述渗透剂的质量百分比浓度为0.1％或0.2％，所述表面活性剂的质量百分比浓度为0.01％。