[发明专利]一种人工双层皮肤及其制备方法在审
| 申请号： | 201910067699.6 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109550080A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 唐辉;杨涛;伍津津;雷霞;杨桂红 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军特色医学中心 |
| 主分类号： | A61L27/40 | 分类号： | A61L27/40;A61L27/60;A61L27/28;A61L27/38;A61L27/50;A61L27/24;A61L27/20 |
| 代理公司： | 重庆鼎慧峰合知识产权代理事务所(普通合伙) 50236 | 代理人： | 周维锋 |
| 地址： | 400042 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 真皮层 双层皮肤 表皮层 制备 人工皮肤 血管 工程技术领域 正常人体皮肤 组织结构特征 细胞 表皮细胞 皮肤缺损 器官组织 生理功能 天然皮肤 细胞分布 细胞分化 血管结构 支架材料 染色 切片 氧气 修复 移植 覆盖 赋予 应用 | ||
1.一种人工双层皮肤，包括表皮层和真皮层，其特征在于，所述真皮层包括支架材料和真皮层细胞，还包含有血管样结构；所述表皮层为覆盖在真皮层的表皮细胞层。
2.根据权利要求1所述的人工双层皮肤，其特征在于，所述真皮层的支架材料为胶原蛋白与壳多糖。
3.根据权利要求2所述的人工双层皮肤，其特征在于，所述真皮层的支架材料还包括丝素蛋白、透明质酸、硫酸软骨素、海藻酸盐和/或聚乙烯醇。
4.根据权利要求2所述的人工双层皮肤，其特征在于，所述胶原蛋白是从动物的皮肤、尾腱、跟腱等组织提取的胶原蛋白。
5.根据权利要求1～4任一项所述的人工双层皮肤，其特征在于，所述表皮细胞为人角质形成细胞。
6.根据权利要求1～4任一项所述的人工双层皮肤，其特征在于，所述真皮层细胞为人成纤维细胞和血管内皮细胞。
7.权利要求1～6任一项所述人工双层皮肤的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体步骤为：
a.先混匀真皮层支架材料，再加入真皮层细胞混匀，等待凝固成形；
b.接种表皮层细胞于真皮层支架上；
c.将接种后的复合物用皮肤血管化培养基浸没，37℃，5％CO2下培养4～7天，每隔2～3天更换培养基；待表皮细胞生长融合后，将人工皮肤的表皮层部分暴露于空气中，形成气-液界面使其进一步熟化培养1～2周，此期间每周更换培养基2～3次，从而获得具有血管样结构的人工双层皮肤。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述真皮层细胞终浓度为0.2×105-2×105个/ml，所述表皮层细胞接种量为104-106个/cm2。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述真皮层支架材料为胶原蛋白和壳多糖混合物，所述胶原蛋白浓度为1-1.5mg/ml，所述壳多糖浓度为0.004-0.006mg/ml。
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述真皮层细胞或/和表皮层细胞为原代细胞传代后第3～8代细胞。
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