[发明专利]抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在降低棉铃虫对棉酚的耐受性中的应用

说明书

本发明公开了抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在降低棉铃虫对棉酚的耐受性中的应用。将序列表中的序列1所示的双链RNA或序列表中的序列6所示的双链RNA注射至棉铃虫幼虫的腹部倒数第二与第三足节间处，然后先用正常饲料饲喂24h，测量体重并记为M1；再用含0.1％(m/m)棉酚的正常饲料饲喂72h，测量体重并记为M2；计算净增重；净增重＝M2‑M1。结果表明，与注射序列表中的序列6所示的双链RNA的棉铃虫相比，注射序列表中的序列1所示的双链RNA的棉铃虫的净增重显著降低(p＜0.05)。由此可见，序列表中的序列1所示的双链RNA可以降低棉铃虫对棉酚的耐受性。本发明具有重大的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在降低棉铃虫对棉酚的耐受性中的应用。

背景技术

棉铃虫(Helicoverpa armigera Hübner)隶属鳞翅目夜蛾科，广泛分布在我国及世界各地。棉铃虫为杂食性害虫，寄主植物有棉花、玉米、烟草、番茄等30多科200余种，给我国农业生产造成了巨大的经济损失。目前防治棉铃虫害的主要手段是大量使用化学杀虫剂，但伴随产生的一些问题逐渐引起关注，如环境污染，边际效应对非靶标昆虫产生的危害，自然平衡被扰乱引起的害虫猖獗和害虫抗药性的增加等问题。为了解决这些问题，科学家们在寻找更有效的可替代化学杀虫剂的抗虫技术方面做了很多尝试，包括天敌的利用，基于天然产物的杀虫剂的使用，抗虫转基因作物的研发等等。其中，以表达苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)毒蛋白的转基因作物应用最为广泛。Bt毒蛋白可以杀死一些主要以作物为食的害虫种群，而对脊椎动物和其它生物无害。近年来，在实验室或者种植Bt转基因作物的大田中都发现对Bt蛋白产生抗性的害虫。另一方面，由于长期种植Bt转基因作物，农田的害虫种群结构产生了变化，由单一害虫占主导的种群结构逐渐发展成多个害虫占主导的种群结构，这为控制害虫带来了更多困难。综上所述，亟待一种经济有效、环境友好的方法控制棉铃虫具有重要意义。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是由双链RNA引发的基因沉默现象，通过体外合成一段与靶基因同源的dsRNA或siRNA，使内源性靶基因mRNA降解并阻断转录，抑制翻译。由于RNAi具有高特异的沉默特性，已经作为一种新的方法来防治农业害虫。主要途径有以下三种：一是通过转基因手段将害虫靶基因dsRNA转入植物体内，当害虫取食转基因植物时，植物源表达的dsRNA引发害虫体内的RNAi现象，使得害虫取食能力下降或杀死害虫；二是将害虫靶基因dsRNA直接注射进昆虫的卵、血腔或局部组织，可引发远距离靶基因的特异性沉默；三是可以通过化学合成具有致死效应的siRNA，做成新型生物农药，对害虫进行防治。

棉酚是一种黄色多酚羟基双萘醛类化合物，属于棉花的主要次生物质之一，主要存在于锦葵植物棉花的根、茎、叶和种子内，对许多生物体具有毒性，是植物源杀虫物质。

发明内容

本发明的目的是防治棉铃虫。

本发明首先保护抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在降低棉铃虫对棉酚的耐受性中的应用。

本发明还保护抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在制备棉铃虫杀虫剂中的应用。

本发明还保护抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质在培育抗棉铃虫棉花中的应用。

上述任一所述的应用中，所述“抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质”可为特异RNA；所述特异RNA可为序列表中的序列1所示的双链RNA。

本发明还保护一种降低棉铃虫对棉酚的耐受性的方法，可包括如下步骤：向棉铃虫注射抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质；与未注射抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质的棉铃虫相比，注射了抑制CCE001a蛋白表达和/或活性的物质的棉铃虫对棉酚的耐受性降低。

上述方法中，所述棉铃虫可为棉铃虫幼虫。