[发明专利]一种苦楝愈伤组织的培养方法

权利要求书

1.一种苦楝愈伤组织的培养方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

(1)外植体的预处理：

选取新鲜的当年生、且具有耐淹优良性状的苦楝叶片作为外植体，并采用洗衣粉冲洗1min；接着，流水冲洗2h，直至外植体表面无残留污垢；最后，将其置于超净工作台中，并用75％乙醇溶液浸泡30s，迅速倒出乙醇溶液后，无菌水冲洗5次，备用；

(2)外植体的消毒：

将预处理后的苦楝叶片，采用1％次氯酸钠溶液消毒5min，再用无菌水冲洗5次，最后用无菌滤纸吸干水分，即得接种所需的无菌外植体；

(3)愈伤组织的培养：

在无菌条件，将步骤(2)中所得的无菌叶片切成1cm×1cm的小片，接着，将其形态学下端直接放入培养瓶中进行愈伤组织的诱导培养，培养15-20天，即得目标所需的愈伤组织；其中，培养瓶中添加的诱导培养基为：MS+1.5mol/L6-BA+0.5mol/L NAA+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.8g/L PVPK-60，pH5.8；培养条件为：培养温度25±1℃，光照时间14-16h/d，光照强度1500-2000Lx。

2.根据权利要求1所述的苦楝愈伤组织的培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中，每个培养瓶中接种3个切割后的无菌外植体。

3.根据权利要求1所述的苦楝愈伤组织的培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中，培养条件具体为：培养温度25℃，光照时间15h/d，光照强度1750Lx。