[发明专利]用于治疗3A型粘多糖贮积症的基因药物构建体

说明书

本专利发明提供了可用于3A型粘多糖贮积症的新型基因治疗药物构建体，可有效表达重组人乙酰肝素‑N‑硫酸酯酶（SGSH），用于制备腺相关病毒载体介导的基因治疗药物制品。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及两种携带SGSH基因表达框的重组腺相关病毒载体及其在治疗IIIA型粘多糖贮积症的应用。

背景技术

粘多糖贮积症(mucopolysaccharidosis，MPS)是一类因溶酶体内相关的酸性水解酶缺乏或活性降低使酸性黏多糖(也称糖胺聚糖，glycosaminoglycan，GAG)无法降解或降解不完全，导致GAG及其中间代谢产物在体内堆积引起的严重致残、致死的单基因遗传性代谢病^[1]。GAG是一类蛋白多糖，其代谢产物的主要类型及在体内的分布情况如下：(1)硫酸皮肤素(dermatan sulfate，DS)，主要分布于皮肤、韧带、动脉及心瓣膜组织里；(2)硫酸软骨素(chondroitin sulfate，CS)(包括4-CS、6-CS)，主要存在于骨、软骨、角膜、肌腱、血管等组织；(3)硫酸乙酰肝素(Heparan Sulphate，HS)，主要存在于大动脉、肝、肺和各种细胞膜表面；(4)硫酸角质素(keratan sulfate，KS)，为角膜、软骨的基质成分；(5)透明质素(hyaluronan，HA)，广泛存在于关节液、软骨、结缔组织基质、皮肤、脐带和玻璃体液中^[2]。这些代谢不完全物的过量堆积，会影响细胞的正常功能，从而导致患者多器官、多组织的受损。

根据溶酶体分解酶缺陷及贮积粘多糖种类的不同，目前可将MPS分为7大型17种亚型，包括：MPS Ⅰ型(含ⅠH、ⅠS、ⅠH/S三种亚型)，MPS Ⅱ型(含ⅡA、ⅡB两种亚型)，MPS Ⅲ型(含ⅢA、ⅢB、ⅢC、ⅢD四种亚型)，MPS Ⅳ型(含ⅣA、ⅣB两种亚型)，MPS Ⅵ型(含ⅥA、ⅥB两种亚型)，MPS Ⅶ型，MPS Ⅸ型(含HYAL1、HYAL2、HYAL3三种亚型)^[3]。MPS Ⅴ型后经证实实际为MPS Ⅰ S亚型， MPS Ⅷ型也被证实不是一个新的类型，因国际MPS命名机构的提议，原先的编号被保留。国内以MPS Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ四型较常见。除MPS Ⅱ型为X染色体连锁隐性遗传(XR)外，其余均为常染色体隐性遗传(AR)。

MPS Ⅲ型(又称Sanffilippo综合征)根据缺乏的酶的不同及成纤维细胞混合培养结果将本病分为A、B、C、D四种亚型。A型为乙酰肝素-N-硫酸酯酶(N-sulfoglucosaminesulfohydrolase，SGSH)缺乏，B型为α-N-乙酰葡糖胺酶缺乏，C型为N-乙酰基转移酶缺乏，D型为葡糖胺-6-硫酸酯酶缺乏。以上酶的缺乏均可引起硫酸(类)肝素(HS)在体内无法正常降解从而蓄积^[4]。