[发明专利]一种利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法

权利要求书

1.一种利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，包括：

步骤1：配制培养基，灭菌，接入活化后的木醋杆菌或红茶菌，静态培养5~10天；

步骤2：在1~2%的NaOH溶液中80℃水浴或者煮沸细菌纤维素膜至透明，用0.5~1%的乙酸浸泡0.5-1h，用蒸馏水清洗，将洗净的膜搅碎制备细菌纤维素匀浆液；

步骤3：配制2%~4%海藻酸钠溶液，将海藻酸钠溶液与细菌纤维素匀浆液按照重量比1:2-200:1混合，得到海藻酸钠复合材料溶液，称取氯化钙粉末配制成1.5%~4.5%的氯化钙溶液；

步骤4：称取活性干酵母粉与生理盐水配成质量浓度为30%~60%的菌悬液，将海藻酸钠复合材料溶液与菌悬液按照重量比90：10~95：5混合，取此悬液逐滴滴入到氯化钙溶液中固定化酵母细胞。

2.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的步骤1中的培养为25℃~30℃恒温生化培养箱培养。

3.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述步骤2中的“将洗净的膜搅碎制备细菌纤维素匀浆液”的具体步骤包括：将洗净的细菌纤维素膜用料理机打碎，用100~300目滤布过滤，得到细菌纤维素匀浆液。

4.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述步骤3中的海藻酸钠溶液中含有1%~2%琼脂、0.6%~2.0%壳聚糖、0.3%~0.5%明胶、2%~3%卡拉胶以及1%~3%黄原胶中的至少一种。

5.如权利要求4所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的壳聚糖分子量为1.95×10⁴~6.00×10⁴。

6.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的活性干酵母粉为酿酒活性干酵母粉或是面包活性干酵母粉或是经从斜面活化后培养至生长对数期后期的菌体。

7.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的步骤4中称取活性干酵母粉与生理盐水配成质量浓度为30%~60%的菌悬液后，旋涡震荡10min。

8.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的固定化的时间为1~3h。

9.如权利要求1所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法，其特征在于，所述的利用海藻酸钠复合材料包埋菌体的方法还包括：将所得固定化酵母细胞进行清洗，4℃保藏或使用。