[发明专利]一种时间分辨荧光免疫分析内质控的方法

权利要求书

1.一种时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：包括如下工作步骤：

(1)在铕离子标记的免疫反应试剂中添加钐离子标记的免疫反应试剂，两者进行反应；

(2)在固相包被载体上进行的TRFIA分析过程中当含有钐标系统的铕标试剂与微孔板或磁珠上的物质反应完毕之后，进行6次洗液，通过洗涤去除未结合的铕标记物，同时也洗涤去除未结合的钐标记物；

(3)洗涤结束后加增强液，5分钟后检测，用进行双波长测量的时间分辨荧光仪分别测定每一孔的铕离子和钐离子的荧光强度cps，根据钐离子的荧光强度判断反应是否正常；计算钐离子实际荧光强度cps与预设值的差别：(实测值-预设值)/预设值×100％，如果偏差大于20％，则判定该反应不正常，偏差很大，结果不可信。

2.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：在铕离子标记的TRFIA试剂中的标记物中添加一定量的钐离子标记的其它的抗原或抗体,当用反应缓冲液稀释铕离子标记物时，同时稀释钐离子标记物，反应体系中同时进行铕离子标记的被测物的免疫反应和钐离子标记的内质控物的免疫反应，内质控物的免疫反应用于评估全部反应过程中是否产生误差。不同稀土离子标记的免疫反应都可适用于此方法，内质控可以采用互不干扰的任意的另一种免疫反应。

3.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：固相包被载体可以是微孔板也可以是磁珠等具有捕获作用的载体。

4.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：在TRFIA反应过程中，洗涤以去除未反应的铕标试剂，与此同时，去除未反应钐标试剂。

5.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：钐离子荧光强度cps预设值范围在100-100000cps，磁珠的直径范围在10-10000nm之间，免疫检测的反应时间在5-200min之间。

6.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：固相包被的是两种不同的款或抗体的混合物。铕离子标记的可以是抗原也可以是抗体，钐离子标记的是其它的抗原或抗体，铕离子标记抗体(抗原)与固相抗体(抗原)的免疫反应体系与钐离子标记的抗体(抗原)与固相抗体(抗原)的免疫反应体系同时进行但相互不干扰。

7.如权利要求1所述的时间分辨荧光免疫分析内质控的方法，其特征在于：在TRFIA反应过程中，用洗液清洗之后，每孔加200μL增强液，振荡5分钟，用时间分辨荧光仪进行铕离子和钐离子的双波长检测，得到每一孔的铕离子和钐离子的荧光强度cps值；计算钐离子实际荧光强度cps与预设值的差别：偏差＝(实测值-预设值)/预设值×100％，如果偏差大于±20％，则判定该反应不正常，偏差很大，结果不可信。