[发明专利]一种快速检测溶菌酶的分子印迹光子晶体膜及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种快速检测溶菌酶的分子印迹光子晶体膜的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将硅片除杂清洗后处理，得到亲水化基质；

(2)将粒径为240nm单分散二氧化硅微球分散到无水乙醇中，形成胶体分散体系，将步骤(1)制备的亲水化基质以垂直插入二氧化硅微球溶液中，采用垂直自组装的方法，35℃下静置至乙醇完全挥发，得到光子晶体模板；

(3)将聚甲基丙烯酸甲酯薄膜清洗后覆盖在步骤(2)得到的光子晶体模板上；

(4)依次将模板分子、功能单体和交联剂溶于磷酸盐缓冲溶液中，充分混合后得到预聚合溶液；所述模板分子为溶菌酶50mg，功能单体为丙烯酰胺300mg，交联剂为N,N’-亚甲基双丙烯胺150mg；磷酸盐缓冲溶液的pH为6.4；

(5)将引发剂过硫酸铵10mg和加速剂四甲基乙二胺8μL加入到步骤(4)的预聚合溶液中，分散后得到前驱体溶液；吸取一定量的前驱体溶液注入PMMA薄膜与硅片的缝隙中，直到溶液在毛细管和大气压的作用下充满PMMA和硅片之间的空隙，30℃水浴聚合反应6h，得到溶菌酶分子印迹光子晶体聚合膜；

(6)将步骤(5)制备得到的溶菌酶分子印迹光子晶体膜浸泡于氢氟酸质量分数为1.5％的水溶液中刻蚀，去除二氧化硅微球，得到反蛋白石结构的分子印迹光子晶体水凝胶印迹膜；

(7)将步骤(6)得到的反蛋白石结构的分子印迹光子晶体水凝胶印迹膜进行洗脱，直到完全除去溶菌酶模板蛋白质，制备得到的分子印迹光子晶体膜；

所述单分散二氧化硅微球的粒径为200～400nm；所述胶体分散体系中，单分散二氧化硅微球的质量份数为1.0～5.0％；

所述水浴聚合反应的条件为30℃水浴反应2.0～10.0小时；所述引发剂为过硫酸铵，加速剂为四甲基乙二胺，引发剂与加速剂的用量比为(5～50mg)：(5～50μL)。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(6)中，在质量浓度0.5～5％的氢氟酸水溶液中浸泡1～6小时。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(7)中，所述洗脱时，洗脱液为十二烷基硫酸钠和乙酸的混合溶液；在混合溶液中，水为溶剂，十二烷基硫酸钠的质量浓度为1～10％，乙酸的体积浓度为1～15％。

4.应用权利要求1-3任一项的方法制备得到的分子印迹光子晶体膜。

5.权利要求4所述的分子印迹光子晶体膜在快速检测溶菌酶中的应用。

6.一种快速定性检测待测溶液中是否含有溶菌酶的方法，其特征在于：是将权利要求1-3任一项制备得到的分子印迹光子晶体膜加入到待测样品中，使其吸附饱和，若在自然光下发生明显的红移，则待测溶液中含有溶菌酶，且含量大于0.5μmol/L。