[发明专利]固定化转氨酶及其应用在审

专利信息
申请号: 201910076744.4 申请日: 2019-01-27
公开(公告)号: CN110129306A 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: 丰亚辉;陈明洪;王仲清;刘彬;罗忠华;黄芳芳 申请(专利权)人: 广东东阳光药业有限公司
主分类号: C12N11/02 分类号: C12N11/02;C12P17/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 523808 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 转氨酶 固定化 树脂 酶固定化 环氧树脂 应用 离子交换载体 氨基化合物 不对称转化 氨基载体 反应条件 工业应用 固定化酶 过程成本 环境友好 吸附载体 可重复 制药 制备 放大
【权利要求书】:

1.一种固定化转氨酶,所述固定化转氨酶是ω-转氨酶固定于酶固定化载体上得到的,所述酶固定化载体是环氧树脂、氨基载体树脂、吸附载体树脂或者离子交换载体树脂。

2.权利要求1所述的固定化转氨酶,其制备方法包括:ω-转氨酶、酶固定化载体在pH为7.0-9.0的体系中,在15℃-35℃搅拌反应6小时-24小时,然后分离、水洗涤所得固体,得到固定化转氨酶。

3.一种制备权利要求1所述的固定化转氨酶的方法,包括:ω-转氨酶、酶固定化载体在pH为7.0-9.0的体系中,在15℃-35℃搅拌反应6小时-24小时,然后分离、水洗涤所得固体,得到固定化转氨酶;任选将所得到的固定化转氨酶在pH为8.0-9.5的甘氨酸钠溶液中,在20℃-30℃搅拌8小时-16小时,然后分离,用水洗涤,得到固定化转氨酶产物。

4.一种制备化合物II的方法,包括:化合物I在固定化转氨酶和磷酸吡哆醛存在下,在pH值8.5-11条件下,与氨基供体接触反应,得到化合物II,

其中,R为氨基的保护基;所述固定化转氨酶是ω-转氨酶固定于酶固定化载体上得到的,所述酶固定化载体是环氧树脂、氨基载体树脂、吸附载体树脂或者离子交换载体树脂。

5.根据权利要求4所述的方法,在固定化转氨酶和磷酸吡哆醛存在下,在pH值8.5-11条件下,式I所示化合物与氨基供体接触,在5℃-60℃反应一段时间,制得化合物II。

6.根据权利要求4所述的方法,固定化转氨酶和磷酸吡哆醛存在条件下,在缓冲溶液中,在pH值8.5-11条件下,式I所示化合物与氨基供体接触,在5℃-60℃反应8小时-30小时,制得化合物II;其中,缓冲溶液为磷酸二氢钠-氢氧化钠溶液、磷酸二氢钾-氢氧化钾溶液、甘氨酸-氢氧化钠溶液、硼砂-氢氧化钠溶液、柠檬酸-氢氧化钠溶液、三乙醇胺-盐酸溶液、三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸溶液、巴比妥钠-盐酸溶液、硼砂-硼酸溶液中的至少一种。

7.根据权利要求4-6任一所述的方法,所述氨基供体为异丙胺、丙氨酸、正丙胺、1-苯乙胺、甘氨酸或它们的盐酸盐中的至少一种。

8.根据权利要求4-6任一所述的方法,任选加入助溶剂,所述助溶剂为二甲亚砜、甲醇、乙醇或其组合。

9.根据权利要求4-6任一所述的方法,化合物I与固定化转氨酶的质量比为1:0.1-1:10。

10.根据权利要求4-9任一所述的方法,其中,R为叔丁氧羰基、苄基、苄氧羰基、乙酰基、对甲基苯磺酰基、笏甲氧羰基中的任意一种。

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