[发明专利]分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体在审
| 申请号： | 201910077029.2 | 申请日： | 2019-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN109880810A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 史百鸣;王运龙;卢雪峰;李国莹;陆瑞琪 | 申请（专利权）人： | 江苏一鸣生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/645 |
| 代理公司： | 苏州国卓知识产权代理有限公司 32331 | 代理人： | 明志会 |
| 地址： | 225432 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 谷氨酰胺转氨酶 酶原 培养基 突变体 分泌 解脂耶氏酵母 发酵培养基 固体培养基 茂原链霉菌 吸水链霉菌 高产菌株 高效表达 食品级 菌株 替换 安全 | ||
【权利要求书】：
1.一种分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体，其特征在于， 所述分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体采用以下培养基：
LB培养基：Yeast Extract 5，Tryptone 10，NaCl 10；
YPD培养基：Yeast Extract 10，Tryptone 20，葡萄糖 20；
YNB培养基：YNB 6.7，葡萄糖20；
固体培养基则是在液体培养基中加2%的琼脂；
发酵培养基：甘油 15，酵母粉 20，氯化铵2.64，磷酸二氢钾 0.32，无水硫酸镁 0.25，维生素B1 3.34×10-4，调节pH至8.0；
酶原区替换高效表达菌株的构建如下：以实验室保留的质粒pET 20b /pro-TGase为模板，P3和P4为引物进行PCR，通过PCR扩增含有含有TGase的基因片段。
2.如权利要求1所述的分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体，其特征在于，所述分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体采用比色法测定谷氨酰胺转氨酶的酶活。
3.如权利要求1所述的分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体，其特征在于，所述YPD培养基中接种重组菌pro(S.H)TGase与前期构建的出发菌株pro-TGase。
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