[发明专利]一种河北杨组培苗微枝试管外生根方法

说明书

本发明公开了一种河北杨组培苗微枝试管外生根方法；具体包括如下步骤：a、外植体建立，b、增殖培养，c、壮苗培养，d、打顶促茎炼苗，e、促生菌蘸根移栽，f、喷施二氧化碳捕集剂培养；其中步骤d中将打破顶端优势的组培苗继续盖好瓶盖后培养，等到新顶芽形成，茎干粗壮，叶片加厚，颜色浓绿，苗木健壮整齐时开瓶盖，剪取粗壮微枝并使组培苗基部留1~2个芽，这样在移栽过程中，无需清洗培养基，且剪取的微枝只形成顶芽，不展幼叶，没有嫩茎、嫩尖，炼苗移栽损伤率小，该操作利于提高移栽效率，而步骤e和f均可促进植株生根，利于提升生根成活率，本发明方法移栽效率比原来提高45%以上，生根率可达到95%以上。

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，涉及组织培养育苗技术，具体涉及一种河北杨组培苗微枝试管外生根方法。

背景技术

河北杨（学名：Populus hopeiensis Hu et Chow）是杨柳科杨属植物，乔木，高达30米。树皮黄绿色至灰白色，光滑；树冠圆大。叶卵形或近圆形，长3-8厘米，宽2-7厘米。雄花序长约5厘米，花序轴被密毛；雌花序长3-5厘米。蒴果长卵形，有短柄。花期4月，果期5-6月。

分布于华北、西北各省区，为河北省山区常见杨树之一，各地有栽培，多生长于海拔700-1600米的河流两岸、沟谷阴坡及冲积阶地上。

木材可供建筑、农具、箱板等用，做蒸笼材更为合适。为华北、西北黄土丘陵峁顶、梁坡、沟谷及沙滩地的水土保持或用材林造林树种。也为庭院、行道优良树种。

河北杨组培苗在常规的试管外生根培养过程中，存在移栽效率低和生根率低的技术问题，常规培养操作仅能保持78%左右的生根率。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的不足，提供一种可提高移栽效率和生根率的河北杨组培苗微枝试管外生根方法。

为实现上述目的本发明采用的技术方案是：

一种河北杨组培苗微枝试管外生根方法，包括以下步骤：

a、外植体建立：优选干型通直、生长健壮、无病虫害的优良株系一年生休眠枝条，处理后接种到芽诱导培养基中进行培养，用以形成嫩茎；

b、增殖培养；将诱导的嫩茎剪段转接入培养基中进行诱导丛枝分化，增殖培养产生微枝；

c、壮苗培养；将嫩茎剪成1.5~2 cm小段，接入培养基中进行培养，30 d后多数试管苗微枝长到3~5条根以上；

d、打顶促茎炼苗；在河北杨组培苗微枝繁殖到所需生产量时，在超净台上，将组培苗顶芽剪取，将打破顶端优势的组培苗继续盖好瓶盖后转移到炼苗环境中边炼苗边培养，炼苗时间控制在10天左右，等到新顶芽形成，茎干粗壮，叶片加厚，颜色浓绿，苗木健壮整齐时开瓶盖，剪取粗壮微枝，剪取微枝时使组培苗基部留1-2个芽；

e、促生菌蘸根移栽；将高5 cm左右的河北杨粗壮微枝，用镊子轻轻夹取，基部1-2厘米速蘸植物促生菌营广宝原液，再扦插入用63#育苗穴盘装丹麦品氏育苗基质中进行移栽，在智能温室条件下，相对湿度控制在85%左右，光照控制制在1000Lx，温度控制在25℃左右生根培养；

f、喷施二氧化碳捕集剂培养；移栽完河北杨组培苗保湿到相对湿度85%，喷施1000倍液二氧化碳捕集剂-光碳核肥，形成河北杨组培苗良好气体环境，以后每15天喷施一次，每天早晨通风换气20分钟；控制光照8000Lx逐步提高至15000Lx 。

进一步，所述步骤d中，剪取的顶芽接种在需要生根出苗培养基1/2MS+IBA0.5+蔗糖15g/L+琼脂5%g/L中进行培养。

进一步，所述步骤d中，基部留有1-2个芽的组培苗试管内添加适量无菌液体培养基1/2MS+IAA 0.5继续盖瓶盖培养。