[发明专利]从红毛五加多糖提取液中高效快速脱除蛋白及色素的方法

权利要求书

1.一种从红毛五加多糖提取液中高效快速脱除蛋白及色素的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

S1：提取红毛五加粗多糖；

S2：配制反胶束处理液；所述的反胶束处理液由十六烷基三甲基溴化铵溶于正已醇、异辛烷与水组成的混合溶剂得到；

其中，水：正已醇：异辛烷的体积比为30:5:65，反胶束处理液中十六烷基三甲基溴化铵的含量为0.1-0.15mol/L；

S3：使用反胶束处理液处理粗多糖溶液，快速同步脱除蛋白及色素；具体流程如下：

1)将粗多糖溶于蒸馏水，配制成10-30mg/mL的粗多糖溶液；取适量多糖溶液，加入木瓜蛋白酶对粗多糖溶液进行酶解处理，酶解条件为：向粗多糖溶液中加入木瓜蛋白酶，调整pH为6.5-7.0，置于55～65℃下酶解 60-120min；然后于沸水浴中灭活5-15min，冷却至室温；并加入NaCl至浓度0.4mol/L;

2)以溶液体积的1/6至1/5比例向上述溶液中加入反胶束处理液，剧烈震荡5-15min，然后8000-10000rpm离心10-15min使溶液分层，取下层溶液；

以及，包括后续的透析纯化处理步骤如下：

S4：将脱蛋白及色素后的所得多糖溶液调整至10-50mg/mL，在透析袋中用蒸馏水透析12-24h，再用4-5倍体积的95％乙醇醇沉，静置24h后抽滤，依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，真空干燥即得红毛五加多糖；

其中，所述步骤S1提取红毛五加粗多糖的具体操作如下：

1)原料预处理：

将干燥后的红毛五加粉碎，过40-60目筛，将粗粉按1g:8-10mL的料液比添加85-95％体积分数的乙醇溶液，35-45℃回流脱脂1-2h，除去脂类、单双糖成分，减压过滤，将滤饼中的乙醇溶剂蒸干，回收粉末备用；

2)提取粗多糖：

将脱脂处理过的红毛五加与去离子水按料液比1g:10-15mL的比例混合，在50-60℃下浸泡3-5h，然后在90-100℃下超声处理15-30min后进行回流提取2-3次，每次40-60min，合并收集提取液；

以8000-8500rpm离心20-30min并收集上清液，真空浓缩至原药材量的1-1.5倍重量，将浓缩后的滤液加入4-5倍体积的95％乙醇进行室温醇沉16-24h，抽滤，将醇沉后的上清液减压浓缩回收乙醇溶剂后，对浓缩液再次醇沉，合并沉淀，然后依次用无水乙醇、丙酮淋洗，干燥，即得红毛五加粗多糖。