[发明专利]一株重组鸭干扰素-α乳杆菌的构建及其应用在审
| 申请号： | 201910078186.5 | 申请日： | 2019-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN109517779A | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 江国托;李凤华;许书珍 | 申请（专利权）人： | 大连三仪动物药品有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/21;C12N15/74;C12R1/245 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 | 代理人： | 郑明 |
| 地址： | 116036 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乳杆菌 构建 干扰素- α 重组菌株 干扰素 鸭病毒性疾病 动物干扰素 生物学功能 鸭α干扰素 重组乳杆菌 保藏 表达载体 传递系统 理论基础 木糖诱导 生物活性 重组载体 蛋白 合成 基因 治疗 预防 应用 成功 开发 | ||
1.一株重组鸭alpha干扰素乳杆菌，其特征在于该重组鸭alpha干扰素乳杆菌含有连接有如序列1所述DuIFN-α目的基因的表达载体获得的重组表达载体DuIFN-α-pPG612.1；该重组菌株被命名为乳杆菌(Lactobacillus)DuIFN-α-pPG612.1/L.393株菌株，简称乳杆菌DuIFN-α株，并已于2018年12月28日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.17049。
2.如权利要求1所述一株重组鸭alpha干扰素乳杆菌，其特征在于其中序列1为DuIFN-α目的基因核苷酸序列为：
3.如权利要求1所述一株重组鸭alpha干扰素乳杆菌，其特征在于该重组菌的表达的外源蛋白为鸭alpha干扰素；该表达产物不经分离纯化，直接制成活菌制剂。
4.如权利要求1所述一株重组鸭alpha干扰素乳杆菌，其特征在于该该重组菌是通过以下步骤构建的：
(1)以提取的鸭肝脏基因组DNA为模板扩增出DuIFN-α目的基因片段；
(2)回收并纯化目的基因片段经测序，测序结果确认该PCR产物确为DuIFN-α目的基因；
(3)将经双酶切的pPG612.1表达载体与步骤(2)中的目的基因片段连接获得重组DuIFN-α-pPG612.1表达载体；
(4)将重组DuIFN-α-pPG612.1表达载体经电转化转入Lactobacillus Casei株乳杆菌细胞中后涂布含有氯霉素的MRS培养平板，37℃静置培养36h后挑取阳性克隆子经测序确认，获得构建阳性重组乳杆菌菌株，该重组菌株被命名为乳杆菌(Lactobacillus)DuIFN-α-pPG612.1/L.393株菌株，简称乳杆菌DuIFN-α株，并已于2018年12月28日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.17049。
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