[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其在降解邻苯二甲酸二丁酯中的应用

说明书

本发明涉及一株保藏编号为CGMCCNo.16233的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及其在降解邻苯二甲酸二丁酯中的应用；该枯草芽孢杆菌可制备成菌剂，应用于叶菜种植体系中土壤源塑化剂残留污染的修复，以及降低该土壤源塑化剂向叶菜可食用部分的吸收转运，该枯草芽孢杆菌属于土壤常见益生菌,能长期定植于蔬菜植株，在不影响蔬菜品质的前提下，高效降低塑化剂残留，实现绿色安全生产。

技术领域

本发明涉及微生物学与食品安全领域，特别是一株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)及其在降解邻苯二甲酸二丁酯中的应用。

技术背景

塑化剂(plasticizer)又称增塑剂，是一类无色油状合成化合物，广泛用于各类塑料产品生产，如涂料、塑料包装盒或包装膜、医护管件、可伸缩玩具、农药以及聚氯乙烯材料等。作为一种代表性的塑化剂，邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate，DBP)的产量高达每年数百万吨，同时其极容易释放进入环境，污染生态圈及食物链。

由于DBP的挥发性，以及其与塑料产品之间的弱化学键，使得食品在包装和运输过程中与塑料制品接触会污染上塑化剂，但最具危害的还是作物在生产过程中吸收进体内的塑化剂残留。叶菜中残留积累的DBP是人类DBP暴露的主要来源(Zhang,Y.,Tao,Y.,Zhang,H.,Wang,L.,Sun,G.,Sun,X.,Erinle,K.,Feng,C.,Song,Q.,Li,M.,2015.Effect of di-n-butyl phthalate on root physiology and rhizosphere microbial community ofcucumber seedlings.J.Hazard.Mater.289,9-17.)，长期接触积累会致癌，干扰内分泌系统以及降低雄性生育能力。因此，邻苯二甲酸二丁酯已被美国环境保护署(USEPA)列为一种重点污染物。目前已经报道的土壤修复剂主要聚焦在土壤重金属污染治理修复，以及利用有益微生物群来提高土壤的肥力，专门针对塑化剂，特别是邻苯二甲酸二丁酯土壤污染进行治理的修复剂还未见报道。

文献“邻苯二甲酸二丁酯降解菌株的筛选鉴定及其降解特性研究”(李建龙等，现代食品科技，2014)，公开了一株自土壤中筛选的具有DBP降解功能的枯草芽孢杆菌，但该文献仅公开了体外降解实验(培养基条件下的)，并未公开土壤和植株体内降解实验效果。

随着人们生活水平的提高，对新鲜蔬菜的需求也越大。而温室塑料大棚及化学农药的使用目前是保障叶菜供应的最高效手段，这就不可避免地导致栽种土壤中塑化剂的污染。叶菜的快速生长特性决定了它会通过根部组织从土壤中吸收大部分水分和养料，这伴随着塑化剂残留进入叶菜可食用部分，最终被人类食用而危害人体健康。鉴于此，探索有效修复土壤塑化剂残留污染及寻找阻断塑化剂从栽种土壤进入叶菜中的方法对于生态环境保护，绿色农业生产及人类可持续发展都显得十分重要。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一株从植物中筛选分离到的植物内生菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，该菌株可针对土壤主要塑化剂邻苯二甲酸二丁酯(DBP)进行降解，并可进一步制备为修复剂，能够有效降解残留于栽种土壤中的塑化剂污染，进而减少其向叶菜中的吸收转移，不影响叶菜植株的正常生长，不引入其他污染源。

首先，本发明提供了一株保藏号为CGMCC NO:16233的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，申请人将其自命名为HB-T2，芽孢杆菌属；该菌株分离自多年生本草植物酸模体内，菌株呈棒杆状,能产芽孢，多数对动植物无害。

其次，本发明还提供了保藏号为CGMCC NO:16233的枯草芽孢杆菌在降解邻苯二甲酸二丁酯中的应用，特别是在降解土壤或叶菜植株体内邻苯二甲酸二丁酯污染的应用。