[发明专利]HEATR1基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明涉及HEATR1基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明设计了针对人HEATR1基因的小分子干扰RNA序列，RNA干扰载体和RNA干扰慢病毒，进一步检测了HEATR1基因的沉默效率、HEATR1‑siRNA慢病毒对肿瘤细胞增殖能力和凋亡水平的影响，结果显示采用RNAi方法下调人HEATR1基因的表达后可有效抑制肿瘤细胞的增殖和生长并促进其凋亡，表明HEATR1基因是原癌基因，可作为肿瘤治疗的靶点，通过RNAi方式沉默HEATR1基因的表达可作为抑制肿瘤发展的有效手段，本发明构建的siRNA、RNA干扰载体和RNA干扰慢病毒可用于制备高效的抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体地说，涉及HEATR1基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

随着人类生活习惯和行为模式的改变，以及农工业发展过程带来的环境污染和人口老龄化等原因，恶性肿瘤成为人类致死的主要疾病。世界卫生组织国际癌症研究中心(IARC/WHO)的最新数据显示恶性肿瘤在全球的发病率呈上升趋势，2008年760万人死于恶性肿瘤，其中64％发生在发展中国家。在我国，肿瘤防治面临的形势也极为严峻，最新报告显示，在过去30年间，我国恶性肿瘤的发病率和死亡率均呈明显上升趋势；据预测，在未来20-30年间，我国恶性肿瘤发病率和死亡率不断上升的趋势将继续维持。因此，对肿瘤的研究是生命科学和医学领域的持续研究热点之一。

恶性肿瘤传统疗法如放疗、化疗和手术治疗的局限性促使人们寻找新的抗肿瘤方法。随着对肿瘤发生发展分子机制认识的深入，人们已意识到肿瘤是一种基因病，纠正发生缺陷的基因可为肿瘤的治疗提供新的希望。近年来发展了许多针对肿瘤的基因治疗方法的研究，但迄今为止进入临床应用的几种基因药物的临床疗效有限，且具有潜在的、长期的、延迟的副作用，因此，寻求治疗的新靶点和开发新的基因治疗方法已成为国内外肿瘤基因治疗的研究方向。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是一门基因阻断技术，为一种双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)分子在mRNA水平上阻断特异基因的表达或使其沉默的过程，即序列特异性的转录后基因沉默(Post-transcriptional gene silencing，PTGS)。近年来，RNAi已成为肿瘤基因治疗的有效策略。利用RNAi技术可以抑制原癌基因、突变的抑癌基因、细胞周期相关基因、抗凋亡相关基因等表达来抑制肿瘤的发生和发展。

HEATR-1(HEAT repeat containing-1)是一个最初发现在不同的蛋白质家族，包括亨廷顿蛋白、延伸因子3(EF3)、PR65/亚基蛋白磷酸酶2，HEATR1位于人染色体1q43上，其mRNA长度为8497bp，编码相2144个氨基酸的蛋白质,基因是一个7kb的多重拼接基因，参与核仁的前18S核糖体RNA和核糖体生物合成的处理，HEATR有八个亚基构成，同时折叠的HEATR1具有拓扑功能，HEATR-1的结构中包含两个反平行的螺旋(helix-1和2)并由IL-2连接。研究表明HEATR-1可能作为调节神经胶质瘤患者的rRNA合成和细胞毒性淋巴细胞，HEATR-1高表达于神经胶质瘤细胞系，基于HEATR-1的T细胞抗原能够诱导CTL产生细胞毒作用。也有文献表明，HEATR1负性调节Akt的激活和活化，通过HEATR1缺失的胰腺癌患者上调Akt活性，可能与化疗药物的耐药相关。但HEATR-1在大多数细胞功能在很大程度上仍是个未知数，且目前关于HEATR1在肿瘤相关领域的报道很少。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供HEATR1基因或蛋白的抑制剂的新用途。

本发明提供了HEATR1基因或蛋白的抑制剂在制备抗肺癌药物中的应用。

作为一种具体实施方式，所述的抑制剂选自以HEATR1蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制HEATR1蛋白表达或基因转录的siRNA、dsRNA、shRNA、miRNA、反义核酸；或能表达或形成所述siRNA、dsRNA、miRNA、反义核酸的构建物。