[发明专利]一种粗勒草组织培养繁殖方法

说明书

一种粗勒草组织培养繁殖方法，包括外植体选取、外植体预处理、灭菌消毒、诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养。通过预处理形成结痂外植体，再进行外植体去痂、芽点轻划十字伤口处理，经诱导、增殖、壮苗和生根培养基培养，可使芽的诱导率达96％以上；芽的每个增殖周期的增值率达5倍，克服了常规繁殖系数低,规模化生产难的缺点。另外，该方法还可有效减低污染率。

技术领域

本发明涉及植物种植领域，特别涉及一种粗勒草组织培养繁殖方法。

背景技术

粗勒草是天南星科粗勒草属(Aglaonena)植物的通称。原产于亚洲东南部的印度、泰国、越南、菲律宾、马来西亚及印尼等地，为多年生常绿草本植物，粗勒草株高15-20厘米，叶互生，披针形至狭卵形，叶长10-45厘米，宽4-16厘米，花小不明显，花序为佛焰苞花序，佛焰苞白色或绿白色，果实为浆果，成熟时变红，粗勒草叶片优美，颜色亮丽，可做优美典雅的室内观叶植物，室内植物中属耐阴性最强，这一品种的红色系叶片让它相当引人注目，具有很高的观赏价值。同时可去尼古丁、甲醛等，具有环保与观赏两重特点，深受广大的消费者的青睐。吉祥粗勒草叶片中有极大比例的红色区块,缺乏可以进行光合作用的叶绿素,因此生长缓慢,生产成本较高。

粗勒草通常以分株、扦插和播种进行繁殖。分株速度慢，播种繁殖虽然是选育性品种的有效手段，但需要的时间长，种子萌芽到成株需2-3年，并且后代易分离，且果实也较少。

目前，生产上常规繁殖大多以顶芽和茎段两种扦插法进行繁殖，但繁殖速度及数量有限，并且对性状优良的母本损伤较大，研究采用组织培养繁殖种苗，可大规模生产，存在速度快、整齐、量大，对母本的损伤较小，还能保持其母本的优良性状等优点。对于粗勒草组织培养，仅见刘俊仙等2009报道了粗勒草茎段的消毒灭菌和不定芽诱导研究，但存在污染率较高(“黑美人”25.56％，“银皇后”29.6％)，且后续的增殖率未有说明。由于粗勒草品种较多，其生长习性也有所不同，组培的增殖倍率也各不相同，有时越是好看的品种在种植、扦插或是组培等技术上难度也相对越大，有的品种在组培继代过程种的增殖倍数不高。因此，粗勒草的组织培养亟需解决污染率高，诱导成功率低，增殖倍数少等缺点，前人研究未有完整的粗勒草组织培养繁殖技术。

发明内容

为此，需要提供一种低污染率，诱导成功率高，增值倍数高的粗勒草组织培养繁殖方法。为实现上述目的，发明人提供了一种粗勒草组织培养繁殖方法，包括以下步骤：

外植体选取：在粗勒草生长旺盛期，选择长势良好、健壮、叶色美丽、当年生或多年生、株高25-35cm的植株，剪取带有3-5个节的当年生嫰茎为外植体；

外植体预处理：将嫩茎清洗后，切去嫩茎上其他叶片，保留两片心叶；将嫩茎常温水培2-3天至叶片切口结痂，得到预处理后的外植体；

灭菌消毒：对叶片切口表面的结痂膜进行剥离，然后用75％酒精对嫩茎表面进行擦拭，再用0.01％HgCl₂浸泡嫩茎10-12分钟，最后用无菌水对嫩茎进行冲洗，得到灭菌消毒的外植体；

诱导培养：将灭菌消毒的外植体剪成0.8-1.0cm的茎段，每个茎段中有一个芽点，剥去茎段上芽点的表皮，然后在剥去表皮的芽点上划十字切口，切口深度为0.3-0.5mm，最后按芽点向上的方向将茎段水平放置在诱导培养基上进行20-30天的诱导培养，直至诱导出2-3cm的幼芽；所述诱导培养基为MS培养基与2.0-5.0mg/L的BA和0.2-0.5mg/L的NAA混合配置；

增殖培养：幼芽按节切段后，将芽段转接到增殖培养基上进行传代增殖培养，得到分化出的丛芽；所述增殖培养基为MS培养基与3.0-4.0mg/L的BA和0.3-0.5mg/L的NAA混合配置；

壮苗培养：将分化出的丛芽切成单株接种到壮苗培养基上,待培养20-30天，至幼苗株高2-5cm且其上丛芽已生长；所述壮苗培养基为MS培养基与1.5-2.0mg/L的BA和0.1-0.2mg/L的NAA混合配置；