[发明专利]粉红粘帚霉、其固体发酵菌剂及其应用

说明书

本发明公开了一种霉粉红粘帚霉、其固体发酵菌剂及其应用，旨在解决化学防治污染、生防菌筛选复杂、生产工艺复杂的技术问题。筛选一株粉红粘帚霉菌（Clonostachys rosea）NF‑06，其保藏编号为CGMCC No.16262。培养制备一种由粉红粘帚霉菌株NF‑06固体发酵而得的固体发酵菌剂。将所述粉红粘帚霉菌株NF‑06或所述固体发酵菌剂在防治植物根结线虫病中应用。本发明的方法简单易行、成本低，孢子粉有效活菌数高，对生态安全友好，能够较少化学药剂的使用，生产工艺简单，成本低，有利于应用和推广。

技术领域

本发明涉及农业生物防治技术领域，具体涉及一种粉红粘帚霉、其固体发酵菌剂及其应用。

背景技术

病虫害是影响农产品产量和品质的重要因素，其中根结线虫对作物生长的危害逐渐严重。根结线虫主要侵染植物根系，使根系产生根结或结瘿，重病株根系萎缩畸形，吸收营养物质功能受损，导致植株发育不良、早衰等症状，同时根结线虫的侵入在根部留下伤口，导致枯萎病、根腐病等真菌病害的发生。根结线虫病害发生后，一般减产10%～20%，严重的可达75% 以上，已成为农业生产中的一大障碍。

防治根结线虫可通过农业防治、物理防治、抗病育种、化学防治和生物防治。目前对根结线虫的防治主要以化学防治为主，由于化学杀线剂的毒性强、残留高、破坏土壤生物区系，对人类和环境造成了严重的危害。

随着科学技术的发展，对生存环境的追求，农业资源的持续利用、野生生物的物种多样性及环境保护，生物防治是从生态角度研究的新方向。根结线虫生防菌的研究主要在筛选对植物根结线虫具有防治作用的菌株，然而，生防菌筛选过程复杂，工作量大；生长缓慢，生产工艺复杂，成本高，大大限制了生防菌的应用和推广。

因此，亟需研发探索新的对根结线虫具有生物活性的新生防资源，以促进农业无害生产和可持续发展。

发明内容

本发明提供了一株新的粉红粘帚霉NF-06，制备了由粉红粘帚霉菌株NF-06固体发酵而得的固体发酵菌剂，并将粉红粘帚霉菌株NF-06或固体发酵菌剂在防治植物根结线虫病中应用。以解决化学防治污染、生防菌筛选复杂、生产工艺复杂的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

筛选培养出一株粉红粘帚霉菌株NF-06，其分类命名为Clonostachys rosea，于2018年9月12日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为CGMCC No.16262。

利用上述粉红粘帚霉菌株NF-06经固体发酵可制得可用于生物防治的固体发酵菌剂。

所述固体发酵菌剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）将所述粉红粘帚霉NF-06接种到固体培养基中，25℃活化培养4～6 d；

（2）将活化的菌接种至种子液培养基中，在25℃，180r/min条件下，培养45～50 h，得种子液；

（3）将种子液按照重量百分比为3～10%的比例接种到发酵固体培养基中，在黑暗中于25℃培养12～15 d；

（4）取固体发酵培养物在35～45℃下干燥至含水量为8%～10%，粉碎，过40～60目筛子，即得。

优选的，在步骤（1）中，所述固体培养基为PDA培养基；

优选的，在步骤（2）中，所述种子液培养基为PD培养基。

优选的，在步骤（3）中，所述发酵固体培养基的配方为：以重量百分比计，玉米粉30%、淀粉20%、蚕豆粉5%、虾粉10%、麦麸15%，秸秆20%。

进一步的，所述秸秆的制备方法为：选成熟小麦脱粒后剩余的茎叶，粉碎至长1.5～2.5 mm，宽1～2 mm，即得。