[发明专利]一种检测铅离子的电化学传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种检测铅离子的电化学传感器，其特征在于，在电极上依次修饰有CP2层、HP1-HP2-HP3-CP1-金纳米（AuNP）层、[Ru(NH₃)₆]³⁺层；

所述的HP1-HP2-HP3-CP1-AuNP层由均相溶液反应获得，原料包括SP-AuNP、DP、HP1、HP2、HP3以及待测目标物；

所述的DP与SP-AuNP能够形成DNA酶，在铅离子存在的条件下，DNA酶将修饰在纳米金上的SP链切割成CP1和TP，TP用于引发催化发夹组装反应形成HP1-HP2-HP3聚合体，CP1-AuNP则与聚合体的末端部分杂交成HP1-HP2-HP3-CP1-AuNP层；

所述的SP、CP1、TP、HP1、HP2、HP3、CP2的碱基序列为：

DP序列如SEQ No.1所示；

底物探针SP序列如SEQ No.2所示；

CP1序列如SEQ No.3所示；

TP序列如SEQ No.4所示；

HP1序列如SEQ No.5所示；

HP2序列如SEQ No.6所示；

HP3序列如SEQ No.7所示；

CP2序列如SEQ No.8所示；

所述的SP包括CP1及TP，以及两者中间通过RNA碱基A相连，其与TP的5’端的G碱基之间是铅离子切割位点。

2.根据权利要求1所述的电化学传感器，其特征在于，所述的HP1-HP2-HP3-CP1-AuNP层中HP1、HP2、HP3、CP1-AuNP的摩尔比为1：1：1：3；所述的CP1-AuNP的摩尔是以CP1浓度算的。

3.权利要求1所述的一种检测铅离子的电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对电极进行抛光预处理；

（2）将CP2层修饰到电极表面；

（3）将HP1-HP2-HP3-CP1-AuNP层修饰到电极表面；

（4）将[Ru(NH₃)₆]³⁺层修饰到电极表面；

（5）检测。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）的操作步骤为：将CP2滴加到经过预处理的电极表面，孵育，清洗。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）的操作步骤为：

S1 将PBS缓冲液、HP1、HP2、HP3、SP-AuNP、DP、待测目标物、灭菌水，混合震荡，孵育；

S2 将孵育好的混合溶液滴加到修饰好CP2层的电极上，孵育，清洗。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（4）的操作步骤为：将 [Ru(NH₃)₆]³⁺滴加到第（3）步反应完成电极上，孵育，清洗。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的电极为金电极。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（5）的检测工艺为：以Ag/AgCl为参比电极，以Pt电极为对电极，电位设置为0到-0.5 V，脉冲宽度0.05 V，扫描速率为0.06 s，采用差分脉冲伏安法读取电信号的变化，检测待测目标物。

9.权利要求1所述的电化学传感器在测环境中的痕量铅离子上的应用。