[发明专利]以大菱鲆肌肉为基质的AOZ残留标准物质的制备方法

权利要求书

1.一种以大菱鲆肌肉为基质的AOZ残留标准物质的制备方法，其特征在于所述方法采用药浴方式对大菱鲆进行给药，是以呋喃唑酮在大菱鲆体内经过吸收、蓄积和代谢过程后残留在肌肉组织中而制备的具有呋喃唑酮代谢产物AOZ残留的阳性基质原料；将大菱鲆阳性基质原料经过包括匀浆、冻干、磨粉、封装、杀菌在内的处理，获得基体标准物质样品，并进行基体标准物质样品的均匀性和稳定性验证。

2.根据权利要求1所述的一种以大菱鲆肌肉为基质的AOZ残留标准物质的制备方法，其特征在于所述方法包括大菱鲆基体标准物质原料的获取、基体标准物质样品的制备、基体标准物质样品的均匀性验证、基体标准物质样品的稳定性验证，具体步骤如下：

(1)大菱鲆基体标准物质原料的获取

将正常养殖体质健康的大菱鲆药浴前24h停止投喂饵料，选择呋喃唑酮药浴液，药浴液初始浓度为100～360ng/mL，药浴时间2h，停药后，取出大菱鲆，将表面残留的药物冲洗干净，取大菱鲆肌肉组织样品，获得的大菱鲆肌肉中AOZ的残留浓度为1.5～5μg/kg，并于-20℃条件下冷冻保存，获得大菱鲆基体标准物质原料；

(2)基体标准物质样品的制备

将大菱鲆肌肉组织经过包括匀浆、冻干、磨粉、封装、杀菌在内的处理，得到大菱鲆鱼肉基质的AOZ残留标准物质，大菱鲆冻干粉中AOZ残留量为6～20μg/kg。

(3)基体标准物质样品的均匀性验证

按照整个封装过程的前、中、后随机抽取包装单元，对随机抽取的样品编号，每个随机抽取的单元再取3个平行，测定大菱鲆冻干鱼肉中AOZ残留量，结果采用方差分析法进行统计分析，通过比较F检验值与F临界值的大小来判断样品均匀性；

(4)基体标准物质样品的稳定性验证

稳定性验证包括长期稳定性和短期稳定性验证；

长期稳定性：分别在第0、1、2、4、6个月开展长期稳定性检测研究；每次随机取3个包装单元，每个单元平行测定三次，取三个包装单元测量结果的平均值作为该次长期稳定性检测结果，并对结果统计分析；

短期稳定性：将随机抽取的样品置于-20℃、4℃、25℃恒温箱中保存，分别在第0、3、6、9、12、15d进行短期稳定性监测，并对结果统计分析；

(5)对经过步骤(3)、步骤(4)检验，均匀性和稳定性好的样品即为AOZ残留标准物质。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中呋喃唑酮药浴液初始浓度为100～360ng/mL，药浴时间2h。

4.根据权利要求2所述的一种以大菱鲆肌肉为基质的AOZ残留标准物质的制备方法，其特征在于所述的匀浆：将冷冻保存大菱鲆肌肉组织样品，利用绞肉机进行匀浆；

所述的冻干：将匀浆好的标准物质原料肉样，在-20℃冰箱中预冻后，将其放入冷冻干燥机进行冷冻干燥；

所述的磨粉和混匀：取冷冻干燥后的样品，使用粉碎机进行磨粉，过40目筛板，并对样品进行进一步混匀处理；

所述的封装和杀菌：采用带有密封内盖的棕色玻璃瓶进行样品的分装，封装过程中，充氮气保护，加盖密封并用铝袋真空分口包装，并采用辐照灭菌法进行大菱鲆肌肉冻干粉样品的灭菌处理。

5.根据权利要求2所述方法制备的AOZ残留标准物质。

6.根据权利要求2所述方法制备的AOZ残留标准物质的应用。