[发明专利]一种针对耐药肿瘤细胞的靶向抗肿瘤药物体系及其构建方法

权利要求书

1.一种针对耐药肿瘤细胞的磁靶向抗肿瘤药物体系，其特征在于，

包括小干扰RNA-核酸适配体载体、该载体固载的抗肿瘤药物、以及聚乙烯亚胺修饰的超顺磁性四氧化铁纳米颗粒；所述抗肿瘤药物为蒽环类抗生素和卟啉；

所述小干扰RNA为双链P-gp siRNA，所述核酸适配体为AS1411，核酸适配体在小干扰RNA-核酸适配体载体中表现为具有空间构型的G-四连体结构；

所述双链P-gp siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:2-3所示；所述AS1411的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的针对耐药肿瘤细胞的磁靶向抗肿瘤药物体系，其特征在于，所述蒽环类抗生素为阿霉素或者道诺霉素或者伊达比星或者米托蒽醌或者表阿霉素；所述卟啉为光敏剂TMPyP或者原卟啉或者血卟啉或者血卟啉单甲醚。

3.根据权利要求1-2任一项所述的针对耐药肿瘤细胞的磁靶向抗肿瘤药物体系的构建方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

S1、小干扰RNA-核酸适配体载体制备：

分别将核酸适配体用无核酸酶水溶解，siRNA用DEPC水溶解，按照摩尔比1:1的比例加入核酸适配体和siRNA；然后用等体积的退火液进行退火处理，降至室温后形成小干扰RNA-核酸适配体载体溶液，同时AS1411配体形成具有空间构型的G-四连体结构；

S2、蒽环类抗生素固载：

取S1所得的小干扰RNA-核酸适配体载体溶液，加入蒽环类抗生素混匀后进行固载；

S3、卟啉固载：

取S2所得的混合物溶液，加入卟啉混匀后进行固载；

S4、制得抗肿瘤药物体系：

取S3所得的混合物溶液，加入聚乙烯亚胺修饰的超顺磁性四氧化铁纳米颗粒后得到磁靶向抗肿瘤药物体系。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述步骤S1中退火液的制备方法，包括如下步骤：取KCl、MgCl₂、Tris-HCl于容器中，加水溶解，定量至1L，得到终浓度为200mM的KCl、4mM的MgCl₂、28mM的Tris-HCl的混合液；所述步骤S1中退火处理的温度为90℃，处理时间为10min，缓慢降至室温。

5.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述S2中固载在冰浴条件下进行，固载时间为2h。

6.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述S3中固载在20～40℃条件下进行，固载时间为2h。

7.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述S4中混合后的溶液缓慢震摇1h，得到的磁靶向抗肿瘤药物体系在冰箱中4℃条件下保存备用。