[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌及其分离方法

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，其微生物学分类命名为解淀粉芽孢杆菌GZU03，拉丁文学名：Bacillus amyloliquefaciens GZU03，已于2018年11月9日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC M 2018762。

2.一种分离和培养权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌GZU03的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)选取豆豉样品，利用初筛培养基分离筛选出菌落；

所述初筛培养基的配制：3-10g酪蛋白，1-5g葡萄糖，1-5g酵母膏，1-5g K₂HPO₄，0.5-2.5g KH₂PO₄，0.1-0.5g MgSO₄，蒸馏水1000mL，pH为7.0～7.2；

(2)选取步骤(1)中所述菌落，利用复筛平板培养基分离筛选出酪蛋白水解圈大的菌落，得到产蛋白酶菌落；

所述复筛平板培养基的配制：K₂HPO₄ 5.0g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，(NH₄)₂SO₄ 2.0g，CaCl₂0.1g，NaCl 5.0g，琼脂粉20.0g，酪蛋白5.0g，牛肉膏5.0g，蒸馏水1000mL，pH为7.0；

(3)选取步骤(2)中所述产蛋白酶菌落，利用LB培养基在37℃条件下发酵培养所述产蛋白酶菌落48h，得上清液；

所述LB培养基的配制：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，蒸馏水1000mL，pH为7.0；

(4)对加有可溶性淀粉的LB固体平板培养基进行打孔，然后接入步骤(3)步中所述上清液后，筛选水解圈大的产淀粉酶菌株，培养，鉴别；

所述加入可溶性淀粉的LB固体平板培养基的配制：在步骤(3)所述LB培养基中补加5g可溶性淀粉和20g琼脂。

3.一种解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：

(1)称取胰蛋白胨0.5-2g、酵母提取物0.5-1.5g、NaCl 6-8g、葡萄糖0.5-2g，补充蒸馏水至1000mL，并在110-130℃高压蒸汽灭菌10-30min，待冷却后接入所述解淀粉芽孢杆菌GZU03于30-40℃、170-190r/min进行培养18h±2h，得到种子液；

(2)将1000mL所述种子液于2-5℃、7000-9000r下离心10-20min，收集沉淀，并用6-9g/L的灭菌生理盐水洗涤所述沉淀，然后向所述沉淀中加入1000mL的灭菌生理盐水，摇匀，得到所述解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂。