[发明专利]番茄SlMYB0基因及其在提高植物耐低温性中的应用在审

专利信息
申请号: 201910094106.5 申请日: 2019-01-30
公开(公告)号: CN109777811A 公开(公告)日: 2019-05-21
发明(设计)人: 周艳虹;张露月;喻景权 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 黄欢娣;邱启旺
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 番茄 基因 低温抗性 植物耐低温 植株 应用 氨基酸序列 番茄新品种 核苷酸序列 表达水平 不利环境 调控机制 番茄植物 分子机理 基因敲除 基因资源 理论基础 逆境信号 耐低温 构建 耐受 应答 诱导 研究 调控 培育 发现
【权利要求书】:

1.番茄SlMYB0基因,其特征在于,所述基因为以下1)-4)中的任意一种核苷酸序列:

1)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;

2)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且具有不改变原核苷酸序列功能的,具有相同功能的核苷酸序列;

3)在严格条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交且具有相同功能的核苷酸序列,所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下杂交,并用该溶液洗膜;

4)与1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且编码相同功能蛋白质的核苷酸序列。

2.由权利要求1所述的番茄SlMYB0基因编码获得的蛋白质,其特征在于,其具有以下之一的氨基酸序列:

1)SEQ ID No:2所示的氨基酸序列;

2)SEQ ID No:2所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸且具有同等活性的由1)衍生的蛋白质。

3.番茄SlMYB0基因在提高植物耐低温能力中的应用,其特征在于,所述基因为以下1)-4)中的任意一种核苷酸序列:

1)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;

2)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且具有不改变原核苷酸序列功能的,具有相同功能的核苷酸序列;

3)在严格条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交且具有相同功能的核苷酸序列,所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下杂交,并用该溶液洗膜;

4)与1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且编码相同功能蛋白质的核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,通过基因过表达技术使得所述番茄SlMYB0基因的表达水平上升。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述基因过表达技术具体如下:

提取番茄总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板,F和R为引物,扩增SlMYB0基因,将扩增产物构建到植物过表达载体上;所述引物F和R的核苷酸序列如SEQ ID NO:3和4所示;

将植物过表达载体导入宿主细胞中,再利用其侵染目的植株,筛选阳性转基因植株,获得耐低温的转基因植株。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,过表达载体质粒为pFGC1008::SlMYB0-HA,基因编辑载体质粒pCAMBIA1301::AtU6-sgRNA(SlMYB0)-AtUBQ-Cas9。

7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌细胞或农杆菌细胞。

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