[发明专利]血液中检测lnc_ENST00000319426.3在诊断胃癌分期中的应用

说明书

本发明公开了一种血液中检测lnc_ENST00000319426.3在诊断胃癌分期中的应用，lnc_ENST00000319426.3分子标志物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。涉及lnc_ENST00000319426.3的发现、检测、应用，设计并合成出特异性用于实时定量PCR的检测引物。血液中的lnc_ENST00000319426.3可作为胃癌患者的血浆标志物。本发明提出了lnc_ENST00000319426.3的用途，lnc_ENST00000319426.3在GC患者和正常人血液样本中表达量存在差异，并且与分期相关，因此lnc_ENST00000319426.3具有成为GC生物标志物的应用前景。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子生物学领域，具体为一种血液中检测lnc_ENST00000319426.3在诊断胃癌分期中的应用。

背景技术

目前，胃癌仍然在全球癌症相关死亡排名第三位，是社会的主要健康负担之一。在中国，胃癌是第二大流行癌症，也是导致癌症死亡的第二大原因，2015年估计有679,100新病例和498,000人死亡。虽然手术技术和联合化疗方案有所进步，但在大多数国家，胃癌的5年总生存仍低于30％，因为缺乏胃癌早期诊断标志物。因此，不断探索GC的发生发展机制，寻找新的早诊、预后以及治疗相关的分子标志物，是提高GC患者疗效及改善预后的重要手段。

非编码RNA(noncoding RNA，ncRNA)之前一直被认为是转录过程中产生的“噪音”，随着现代生物学技术的发展，ncRNA得到越来越清晰的认识。其中，lncRNA是一类长度超过200个核苷酸的功能性RNA分子，通常缺失开放性阅读框，从而缺乏编码蛋白的能力。lncRNA参与多个层面的基因调控，包括表观遗传水平调控、转录水平调控及转录后水平调控。近期，国内关于肿瘤lncRNA表达谱的研究十分火热，包括高通量芯片筛选和RNA深度测序，以及qRT-PCR在内的实验技术均已发展的十分成熟，发现lncRNA与人类疾病密切相关。在同一种疾病中可发现不同的lncRNA差异表达谱，同时也发现同一lncRNA可在多种肿瘤疾病中检测到并在肿瘤进程中发挥不同的生物学作用，如lncRNA-UCA1在肺癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、骨肉瘤等常见恶性肿瘤中。LncRNA具有相对稳定二级结构，且可分泌到体液中，已被证实在人血浆、尿液和唾液甚至是胃液等体液中检测到lncRNA。基于此，研究人员已在此前的研究中探索了lncRNA在体液中(包括血浆中)作为肿瘤生物标记物的潜在作用。例如，在前列腺癌患者血浆中，MALAT1[11]表达水平明显高于非前列腺癌患者，其敏感性和特异性分别为58.6％和84.8％，有望成为前列腺癌诊断和分期的检测指标。在尿液中也有检测到PCA3的表达，可为提高前列腺癌的早期诊断率提供依据。

目前ESCC尚没有血浆肿瘤标志物来评估病情，内镜是金标准。通过检测患者血液中CEA/CA199/CA153等肿瘤指标来评估患者的病情，但是创伤大，患者不易接受。

发明内容

为解决上述问题，本发明公开了一种血液中检测lnc_ENST00000319426.3在诊断胃癌分期中的应用，测外周血中的lncRNA分子，这一检查方法容易被受检者接受，更可成为GC患者的早诊、病情进展的判断以及预后评估的有效手段。我们采用基因芯片技术检测GC患者(早期和晚期)及正常人外周中lncRNA的表达谱，并且再将不同分期(早期vs晚期)的GC患者外周血中的lncRNA作比较，得到在GC发生发展的不同阶段的lncRNA表达谱，筛选出具有研究价值的与临床分期相关的lncRNA，扩大样本验证其在GC患者血浆、组织的表达水平是否一致，为GC的诊断和治疗提供新的选择。

为了达到以上目的，本发明供如下技术方案：

本发明公开了一种血液中检测lnc_ENST00000319426.3在诊断胃癌分期中的应用，所述lnc_ENST00000319426.3分子标志物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。

在本发明中，用于胃癌诊断的试剂为实时定量PCR试剂盒。