[发明专利]一种从贻贝中提取抗冻蛋白肽的方法及其在食品冷藏保鲜中的应用

说明书

本发明公开了一种从贻贝中提取抗冻蛋白肽的方法及其在食品冷藏保鲜中的应用，通过以下步骤制备：步骤1，清洗贻贝，加入水，贻贝与水的质量体积比1：5，对贻贝肉打浆处理；步骤2，调节pH至8.0‑11.0，离心后取上清液，再调节pH值至3.0‑5.0，静置后离心，得到下层沉淀蛋白；步骤3，将所得蛋白溶于蒸馏水中，添加蛋白酶水解；步骤4，反应结束后，加热使酶失活，冰水浴快速冷却后离心，上清液透析，透过液原样冷冻干燥，即得。本发明还提供该蛋白肽在食品冷藏保鲜中的应用，将该贻贝抗冻蛋白肽与壳聚糖、石榴皮醇提物及牛蒡醇提物复配，根据贻贝肽的抗冻效果，壳聚糖成膜特点及牛蒡醇提取物和石榴皮醇提物的抑菌功能，协同作用增强食品保鲜效果。

技术领域

本发明涉及水产食品加工技术领域，具体地涉及一种从贻贝中提取抗冻蛋白肽的方法及其在食品冷藏保鲜中的应用。

背景技术

贻贝属软体动物门，瓣鳃纲，是一种营足丝附着生活的双壳类软体动物。含有多种对人体有益的营养物质，被人们誉为“海中鸡蛋”。干制贻贝肉（淡菜）中含蛋白质65.2%，另外还含有多种矿物质元素、不饱和脂肪酸、抗菌肽等多种功能性物质。我国所产的贻贝大部分以鲜销为主，少数加工成冻品和方便食品，与其它的海产食品相比较而言，贻贝的附加值极低，资源浪费较为严重。因此，深入探究贻贝深加工技术对拓宽贻贝产业具有重要意义。

我国水产品深加工进程缓慢，目前我国对虾加工的主要问题是产品附加值低，加工方式主要是保藏虾或冷冻虾。对虾大多加工成冷冻的虾仁出售，虾仁富含水分和蛋白质，但是在冷冻状态下容易流失组织中的蛋白质和水分，进而影响了对虾的风味，且降低了对虾的营养价值；另一方面虾仁所含的赖氨酸发生非酶褐变生成生成大分子的黑色物质,使虾体变黑，影响感官。因此，对加工工艺进行改造，研制出高效的保鲜和延缓黑变的方法对促进对虾加工产业的发展具有重要的意义。19世纪60年代，Devries在南极鱼类的血液里发现抗冻蛋白，到目前，科学家们已陆续从鱼类、昆虫、细菌真菌及植物中发现抗冻蛋白。抗冻蛋白可以吸附在冰晶表面，阻挡冰晶的生长，降低冰点，抑制冰晶重结晶，降低有机体所受冰晶伤害。

目前使用较多的水产品保鲜技术有防冻剂和抑菌剂。白靖公开了一种利用植酸钠、肉豆蔻酸、海藻酸钠、茶多酚、乳酸链球菌素等组成的保鲜配方（专利申请号：CN2017113324055）；另外，白靖还公开了一种由植酸钠、牛至油、蜂胶、硫酸亚铁、溶菌酶、竹叶抗氧化物和冬酞胺等组成的保鲜配方（专利申请号：CN2017113324074）。白靖这两个用于食品保鲜的配方虽然原料廉价易得，生产成本低，但是这两个配方只是能够抑制微生物生长，而不能减少冷冻过程中冰晶的生长对组织的破坏。罗永康公布了一种从鱼皮中提取抗冻蛋白的方法（专利授权号：ZL2013105421869），但是这种方法不能将蛋白有效地水解，并且也没有对水解产物做透析处理；而其作为抗冻保护剂在微生物或冷冻食品的低温冷冻保护中的应用时，其效果也较单一，因为没有兼顾微生物对食品保鲜过程的影响。董珊珊公开了一种从贻贝提取多糖的方法（专利申请号：CN2017110430353）；但是目前还没发现从贻贝提取抗蛋白肽，用于食品保鲜的报道。

发明内容

针对现有问题的不足，本发明的第一个目的是提供一种从贻贝中提取抗冻蛋白肽的方法。

本发明的第二个目的是提供一种贻贝抗冻蛋白肽的应用。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是：

一种从贻贝中提取抗冻蛋白肽的方法，通过以下步骤制备得到：

步骤1，清洗贻贝，加入水，贻贝与水的质量体积比1：5，对贻贝肉打浆处理；

步骤2，对步骤1的浆液，调节pH至8.0-11.0，离心后取上清液，再调节pH值至3.0-5.0，静置后离心，得到下层沉淀蛋白；

步骤3，将步骤2所得蛋白溶解于蒸馏水中，添加蛋白酶水解，调节温度和pH值，期间通过滴加NaOH保持反应pH不变；