[发明专利]一种丙烯酸降解菌及其应用

权利要求书

1.一种丙烯酸降解菌，其为大肠杆菌(Escherichica coli)WX，保藏编号为CCTCC NO：M2018746。

2.根据权利要求1所述丙烯酸降解菌，其特征在于，所述大肠杆菌WX的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。

3.根据权利要求1或2所述丙烯酸降解菌，其特征在于，所述大肠杆菌WX的菌落颜色为白色，呈单个菌落，无芽孢，不透明，表面光滑，边缘整齐；透射电镜下观察该菌体的形态为短杆菌，具有周生鞭毛。

4.如权利要求1所述丙烯酸降解菌在生物降解丙烯酸中的应用。

5.利用权利要求1所述丙烯酸降解菌降解丙烯酸的方法，包括以下步骤：

1)将大肠杆菌WX经发酵培养，获得发酵液，即含菌细胞悬液；

2)将含菌细胞悬液接种至丙烯酸液体选择培养基中，以丙烯酸为碳源进行培养，降解丙烯酸，其中，培养条件为：28～30℃、140～160rpm，pH为6.0～8.0。

6.根据权利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步骤2)所述丙烯酸液体选择培养基中，各组分的终浓度为：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200～3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶剂为水，pH值6.0～8.0。

7.根据权利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步骤2)中，所述含菌细胞悬液的OD₆₀₀值为1.0～1.8，含菌细胞悬液的体积接种量为1％～10％。

8.根据权利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步骤1)所述含菌细胞悬液的制备方法为：

a)斜面培养

将大肠杆菌WX接种至斜面培养基，28～30℃培养70～72h，获得菌体斜面；

所述斜面培养基终浓度组成为：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄ 2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200-3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶剂为水，pH值7.0～7.5，琼脂18～20g·L^-1；

b)种子培养

从菌体斜面挑取菌落接种至LB培养基进行种子培养，于28～30℃培养10～12h，获得种子液；

c)发酵培养

将种子液以体积浓度1～10％的接种量接种至发酵培养基进行发酵培养，培养温度28～30℃，获得含菌细胞悬液；

所述发酵培养基中，各物质的终浓度为：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄ 2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200-3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶剂为水，pH值7.0～7.5。