[发明专利]一种以透析袋为基础的高效割胶回收系统及其应用在审
申请号: | 201910098333.5 | 申请日: | 2019-01-31 |
公开(公告)号: | CN109652406A | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 孙泽玮;陈文静;郑良荣 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 赵杭丽 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 割胶回收 透析袋 回收率 玻璃板 应用 电泳缓冲液 核酸分子量 截留分子量 洗脱液组成 回收 加热融化 结合液 漂洗液 平衡液 试剂盒 紫外灯 胶块 用时 核算 | ||
1.一种以透析袋为基础的高效割胶回收系统,其特征在于,由DNA电泳缓冲液,透析袋,透析袋夹,手提式紫外灯,玻璃板,平衡液,结合液,DNA吸附柱,漂洗液,洗脱液组成,其中选用截留分子量小于要回收的核酸分子量的透析袋。
2.根据权利要求1所述的一种以透析袋为基础的高效割胶回收系统,其特征在于,其中DNA电泳缓冲液为TAE缓冲液,平衡液为pH值至9.0~10.0的三羟甲基氨基甲烷溶液,结合液为pH值至5.0~7.0的三羟甲基氨基甲烷和四乙酸二钠的混合溶液,漂洗液选用乙醇,洗脱液为无核糖核酸酶的去离子水。
3.根据权利要求1所述的一种以透析袋为基础的高效割胶回收系统,其特征在于,透析袋的截留分子量小于要回收的核酸分子量,选用截流分子量为3.5KD或1KD。
4.根据权利要求1所述的一种以透析袋为基础的高效割胶回收系统在DNA割胶回收中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,通过以下步骤实现:在DNA电泳结束后,将目的条带进行割胶,割下的胶条装入透析袋内,并根据胶条大小,在透析袋内加入适量DNA电泳缓冲液,用夹子夹闭透析袋,继续电泳,将手提式紫外灯置于玻璃板下方进行实时观察,当观察到DNA条带从凝胶中消失时停止电泳,打开透析袋,收集透析袋内液体,加入结合液,随后使用平衡液预处理DNA吸附柱,将样品加入到DNA吸附柱中离心,使DNA与吸附柱结合,使用漂洗液漂洗2次,室温放置数分钟干燥,最后加入洗脱液洗脱。
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