[发明专利]基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用，碱性磷酸酶便携式检测试剂盒包括二氧化锰纳米片、L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐、多巴胺和缓冲溶液。该检测试剂盒利用便携式近红外激光器对反应产物进行照射，基于其温度变化，低成本的温度计或变色测温贴片便可实现对目标物的灵敏检测，可应用于检测碱性磷酸酶，具有简便、快捷、选择性好、灵敏度高等优势。

技术领域

本发明涉及生物传感技术领域，尤其涉及基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用。

背景技术

近年来，用于在事发地或家庭以及偏远地区快速、低成本的检测目标物(如蛋白质、核酸、小分子及离子)的便携式传感(无大型仪器及专业操作人员)研究已成为研究热点。该类产品的研究与开发对于科学研究、临床检测及生物传感领域有重大意义。随着科学技术的快速发展，即时检测(POCT)已经风靡全球，很多产品均已经商业化。然而，目前比较成熟的便携式传感器只是寥寥无几，还无法满足人们的需求。因此，发展低成本、操作简单的便携检测传感器是十分迫切的。

温度检测设备(温度计，温度贴纸等)，是我们生活中常见的家用设备，基于这些常见的设备通过简单的设计用来检测一些疾病标志物是十分有意义的。由于这些设备本身价格便宜，使用方便，且不需要专业的人才，有望用于目标物的POC检测。近些年来也有人发展了一些温度传感器(温度计)用于对疾病标志物及其他目标物进行检测，然而也存在一些不足，如需要预先采用脂质体等包埋近红外染料，光热转换能力弱等。因此，构建一个操作简单，无需复杂修饰，灵敏度高的温度传感平台是十分必要的。

碱性磷酸酶是一种膜结合酶，存在于生物组织中，可以催化多种磷酸基底物的去磷酸化过程，同时，碱性磷酸酶在细胞生长凋亡进程中的信号传导和细胞内调节过程中扮演重要角色。血浆中碱性磷酸酶的异常表达与多种疾病有关，如骨骼疾病，糖尿病，乳腺癌，前列腺癌及肝功能异常等。因此，发展更灵敏、更优选择性的检测方法去标记碱性磷酸酶水平对于多种疾病的临床诊断具有重要意义。而传统检测碱性磷酸酶活性的方法包括同位素标记法，操作复杂，耗时低效，且需要危害较大的放射性同位素标记物。研究者又创建了一些通过不同的分析技术检测碱性磷酸酶活性的新方法，如色谱法，比色法，化学发光法，电化学法，光谱法，表面增强共振拉曼散射法。比色方法尽管操作简单，但是检测的灵敏度低，其他方法尽管灵敏度有所提升，但仍存在一些不足，如需要大型仪器，复杂的表面修饰以及标记等。因此发展性能优良、便携的分析方法用于碱性磷酸酶活性检测是十分重要的。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，可采用方便、快速检测的信号输出方式——温度进行检测，无需大型仪器和专业操作人员。还提供一种操作简便、快速、便携、灵敏度高、选择性好、且无需专业培训即可快速对碱性磷酸酶进行检测的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，包括二氧化锰纳米片、L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐、多巴胺和缓冲溶液。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，还包括氯化镁。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述缓冲溶液为Tris-HCl缓冲液。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述二氧化锰纳米片的浓度为15μg/mL～20μg/mL。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的浓度为23μg/mL～46μg/mL。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述多巴胺的浓度为20～40μg/mL。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述氯化镁的浓度为0.48mg/mL～4.8mg/mL。

上述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，优选的，所述Tris-HCl缓冲液的pH为7.4。