[发明专利]一种收获三维微载体上的细胞的方法

权利要求书

1.一种收获三维微载体上的细胞的方法，包括如下步骤：1）吸附培养细胞的三维微载体自然沉降或离心，去除上清，得到含有细胞的三维微载体；

2）将含有细胞的三维微载体中加入裂解液，孵育，裂解其中三维微载体；

3）将步骤2）中三维微载体裂解完全后，加入终止液终止裂解或直接进行步骤4）终止裂解；

4）将步骤3）得到的体系离心，弃去上清，即可收获三维微载体上的细胞；

所述裂解液配方为：0.1%胶原蛋白酶、0.1%乙二胺四乙酸、0.05%胰蛋白酶；

所述三维微载体为3D FloTrix微载体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述终止液：根据所选的裂解液组成成分；选自全培养基、含10%血清白蛋白或血清的PBS、胰蛋白酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、PBS和离子螯合剂中的至少一种。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1）中，所述离心的速率为50~1610×g，时间为1~10min；

所述去除上清步骤如下：离心后吸尽上清；然后加入适量PBS，用手轻轻摇晃20~30s，吸尽上清，重复PBS洗一次。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述吸附培养细胞的三维微载体的质量与所述裂解液的体积比为1mg：0.01~5 mL；

所述孵育的温度为4℃~40℃，时间为10s~24h。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述吸附培养细胞的三维微载体的质量与所述终止液的体积比为1mg：0.01~50 mL。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤4）中，所述离心的速率为50~1610×g，时间为1~10 min。