[发明专利]一种单硝酸异山梨酯的检测方法

说明书

本发明涉及一种单硝酸异山梨酯的检测方法，其特征在于：用高效液相色谱法进行检测，固定相是十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱，以水为溶剂，以0.01～0.05mol/L的磷酸盐缓冲液为流动相A，以甲醇为流动相B，梯度洗脱，检测波长为200～220nm。本发明的检测方法可以有效的检测单硝酸异山梨酯中亚硝酸盐的含量，该方法灵敏度高，分离度高，重复性及耐用性好，操作简单，结果稳定可靠，从而可用于单硝酸异山梨酯中亚硝酸盐的控制，为最终成品的质量提供有效保障。

技术领域

本发明涉及一种单硝酸异山梨酯原料及其制剂中杂质的检测方法，具体的涉及一种利用高效液相色谱法检测单硝酸异山梨酯原料及其制剂中亚硝酸盐的方法，属于药物分析领域。

背景技术

亚硝酸盐具有保鲜、防腐、使用后颜色鲜艳等功效，是食品中常用的添加剂，但是亚硝酸盐也是一种剧毒物质，成人摄入0.2～0.5g即可引起中毒，同时亚硝酸盐还是一种致癌物质，其在胃酸等环境下与食物中的仲胺、叔胺和酰胺等反应生成强致癌物质N-亚硝胺。因此，严格控制亚硝酸盐在药品中的含量至关重要。目前亚硝酸盐的检测方法主要是比色法，由于制剂中含有较多的辅料，此方法不适合用于药物产品中亚硝酸盐的检测。

单硝酸异山梨酯用于冠心病的长期治疗，主要药理作用是松弛血管平滑肌，使心肌耗氧量减少，供氧量增多，心绞痛得以缓解。现有技术中，未见有单硝酸异山梨酯原料及其制剂中亚硝酸盐含量的检测。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明采用高效液相色谱法对单硝酸异山梨酯中的亚硝酸盐进行检测，可用于单硝酸异山梨酯原料及其制剂生产中的质量控制。该方法具灵敏度高，峰型好的特点，且分析方法稳定，亚硝酸盐检测限低。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验，最终获得如下技术方案：

一种利用高效液相色谱法检测单硝酸异山梨酯中亚硝酸盐的方法，所述的高校液相色谱法的色谱条件为：

色谱柱：十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；

柱温：30-40℃；

检测波长：200～220nm；

流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液的混合溶剂作为流动相梯度洗脱；

流动相流速：0.8～1.2ml/min。

优选的，所述的流动相梯度洗脱条件为：以体积比计，磷酸盐缓冲液：甲醇＝60-100:40-0。

优选的，所述的流动相梯度洗脱条件为：以体积比计，

优选的，所述的磷酸盐缓冲溶液中磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢胺、磷酸氢二胺中的一种；进一步优选的，所述磷酸盐为磷酸二氢钾。

优选的，所述的磷酸盐缓冲液中磷酸盐的浓度为0.01～0.05mol/L；进一步优选的，所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.01mol/L。

优选的，所述的磷酸盐缓冲液的pH值为3.0-3.5；进一步优选的，所述的磷酸盐缓冲液的pH值为3.1；

优选的，上述色谱条件中检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相的流速为1.0ml/min。

优选的，上述色谱条件中色谱柱为Agilent C18柱4.6×250mm，5μm或KromasilC18柱4.6×250mm，5μm。

本发明所述的一种利用高效液相色谱法检测单硝酸异山梨酯原料及其制剂中亚硝酸盐的方法，具体操作步骤如下所述：

a、取亚硝酸盐对照品适量，加水溶解，配制成每1ml含亚硝酸盐0.005～0.800μg的对照品溶液；