[发明专利]用于修复臂丛撕脱神经损伤的水凝胶包裹HIF-1α过表达慢病毒载体复合物及制备方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及用于修复臂丛撕脱神经损伤的水凝胶包裹HIF‑1α过表达慢病毒载体复合物及制备方法。该用于修复臂丛撕脱神经损伤的水凝胶包裹HIF‑1α过表达慢病毒载体复合物的制备方法，包括步骤一，HIF‑1α过表达慢病毒载体的合成；步骤二，水凝胶原液的制备；步骤三，水凝胶与HIF‑1α过表达慢病毒载体复合物的制备。该制备方法制得的水凝胶包裹HIF‑1α过表达慢病毒载体复合物，能实现HIF‑1α过表达慢病毒载体的局部递送、缓释的作用，并为BPA后神经再生修复和血运重建提供有利影响，并实现BPA损伤局部HIF‑1α基因的过表达，有效促进BPA损伤修复，促进血管新生及运动功能恢复。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及用于修复臂丛撕脱神经损伤的水凝胶包裹HIF-1α过表达慢病毒载体复合物及其制备方法。

背景技术

臂丛神经根性撕脱(Brachial Plexus Avulsion,BPA)是一种严重的中枢- 外周神经系统交界性损伤，随着现代交通的日益发达，事故导致的臂丛神经根性撕脱伤患者日渐增多。神经根从脊髓离断后，常伴有大量运动神经元(motor neurons,MNs)丢失死亡，导致上肢运动感觉功能障碍，极大地影响患者的生活质量(Wang et al.,2015)。由于BPA病情复杂，且解剖位置特殊，目前对于此类患者的治疗重点多集中在神经损伤的治疗。外科多采用神经根移植即将撕脱的神经根或移植神经桥接再植入脊髓，促进中枢神经元轴突再生和神经环路重建，虽可不同程度促进神经功能恢复，但疗效仍不令人满意(Bertelli andMira,1994,Gu et al.,2004)。BPA的治疗常忽略对损伤血管的修复，据文献报导，充足的血供是神经移植成功的关键，血管化神经移植相较无血管化神经移植，肌肉再支配速度快20％(Breidenbach and Terzis, 1984,Bertelli et al.,1996)。因此，保证足够的血供以改善BPA损伤局部缺血缺氧抑制性病理微环境，可为临床治疗BPA损伤提供更有力的理论依据。

低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一种具有转录活性的核蛋白，其有相当广泛的靶基因谱，其中包括与缺氧适应、炎症发展等相关的近100种靶基因，在帕金森、新生儿脑损伤等疾病中起关键作用(Huang et al.,1998,Scholz andTaylor,2013,Feng et al.,2014,Sun et al.,2017)。已有大量研究证实，HIF-1α参与调控缺血缺氧性损伤的过程(Fan et al.,2009)。 BPA损伤后伴随的血管损伤不仅会延缓神经再生的速度，且加速受损神经支配的靶肌肉萎缩，不利于功能恢复。因此，对BPA运动功能的恢复而言，尽早修复受损血管、恢复血供极为重要。HIF-1α可诱导激活血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达，参与血管新生 (Kizaka-Kondohet al.,2003,Gessi et al.,2013,Shan et al.,2013,Li et al., 2017)。文献显示，HIF-1α可通过独立机制对缺血再灌注损伤的神经元产生保护作用(Li et al.,2011)。