[发明专利]分子标志物及其应用

说明书

本发明提出了分子标志物及其应用，具体提出了含有Exon4b的Opa1异形体蛋白作为肝癌标志物的用途。发明人通过q‑PCR检测肝癌和癌旁组织中的线粒体相关基因表达，惊喜地发现，相对于癌旁组织，肝癌组织中带有Exon4b的Opa1异形体蛋白的表达显著下调，而不含Exon4b外显子的Opa1异形体蛋白的表达无统计学差异。由此，含有Exon4b的Opa1异形体蛋白可作为肝癌的特异性分子标志物。

技术领域

本发明涉及生物工程领域。具体地，本发明涉及分子标志物及其应用，更具体地，本 发明涉及含有Exon4b的Opa1异形体蛋白作为肝癌标志物的用途、试剂盒、试剂在制备试剂盒中的用途、肝癌细胞模型、肝癌动物模型以及诊断肝癌或判断肝癌患者预后效果的系统。

背景技术

肝癌是世界上最常见的五种恶性肿瘤之一，其死亡率仅次于胃癌及食管癌。肝癌患者 未经治疗，5年生存率不到10％，然而“小肝癌”根治性切除后5年生存率可达70％。并且， 肝癌早期无明显症状，往往被人忽视，到出现临床症状时，已到中晚期，此时往往已经丧 失了手术机会，这使得肝癌的早期发现和治疗变得格外重要。在早期筛查中，肿瘤标记物 起到了非常重要的作用，但这些肿瘤标记物都存在着或多或少的弊端，筛选并鉴定出新的 特异的肝癌的分子标志物，具有非常重要的临床价值。

因而，现阶段找到一种新的特异的肝癌的分子标志物，对于肝癌的前期筛查和诊断， 意义重大。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

人的OPA1基因位于3号染色体上(Christiane Alexander et al.,2000)，由28个外显子组 成，其产物OPA1(参考前述文献《Christiane Alexander et al.,2000》中的图1-2)是一种核 编码的线粒体动力学相关蛋白，是线粒体网络结构的组分之一，具有类似动力学相关的GTP 酶活性。在人体细胞中，OPA1基因转录后经过复杂的选择性剪接形成8种转录本(Delettre et al.,2001)，进而翻译成8种OPA1异形体蛋白(OPA 1iso-1、2、3、4、5、6、7、8)。这8 种蛋白的区别主要在于其mRNA区段外显子4、4b、5b的选择性剪接(参考下述文献《Ste′phane Duvezin-Caubet et al.,2007》中的图1-32)(Ste′phane Duvezin-Caubet etal.,2007)。

发明人通过q-PCR检测肝癌和癌旁组织中的线粒体相关基因表达，惊喜地发现，相对 于癌旁组织，肝癌组织中带有Exon4b的Opa1异形体蛋白的表达显著下调，而不含Exon4b外显子的Opa1异形体蛋白的表达无统计学差异。因此，带有Exon4b的Opa1异形体蛋白 可作为肝癌的特异性分子标志物。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了含有Exon4b的Opa1异形体蛋白作为肝癌 标志物的用途。需要说明的是，如前所述，OPA1基因转录后经过复杂的选择性剪接形成8种转录本(Delettre et al.,2001)，进而翻译成8种OPA1异形体蛋白(OPA 1iso-1、2、3、4、5、6、7、8)。这8种蛋白的区别主要在于其mRNA区段外显子4、4b、5b的选择性剪接。 本发明中的“含有Exon4b的Opa1异形体蛋白”指的是包含外显子4b的mRNA翻译形成的 异形体蛋白。在一些实施例中，含有Exon4b的Opa1异形体蛋白包括选自Opal iso 3、Opal iso 5、Opaliso 6、Opal iso 8蛋白的至少之一。发明人在实验中惊喜地发现，相对于癌旁组 织，肝癌组织中带有Exon4b的Opa1异形体蛋白的表达显著下调，而不含Exon4b外显子 的Opa1异形体蛋白的表达无统计学差异。因此，带有Exon4b的Opa1异形体蛋白可作为 肝癌的特异性分子标志物。